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发布人：爱必信（上海）生物科技有限公司
发布日期:2022/9/6 9:39:58
养细胞的人往往谈“污”色变，明明已经小心谨慎，明明已经步步为营，恨不得戴着显微镜操作，发现污染则前功尽弃。除了在操作过程中保证严格无菌以外，做好培养器具的清洁以及预防培养基污染更是至关重要。
如何判断细胞污染？
1、培养基浑浊，可以初步判断是细菌污染。
2、培养基不浑浊，有丝状物质可以初步判断是真菌污染。
3、培养基不浑浊、没有丝状物质，但是细胞状态变差，生长变慢，在显微镜下观察可能会有小黑点，是细胞凋亡坏死，释放出大量碎片，看起来就像黑胶虫，细胞传代以后就出现细胞间黑点，细胞空泡化，很多类似凋亡、坏死的细胞，最终细胞漂浮，完全死亡。
培养环境大扫除
细胞房、培养箱、水盘、水浴锅...除了是细胞生长的温床，同时也是孕育杂菌的温床，因此养细胞之前，我们要对它们进行彻彻底底的大扫除！
除菌案例：
抑制枯草芽孢杆菌
加入除菌试剂后，可以显著抑制枯草芽孢杆菌的生长
抑制霉菌
接种 106 cfu/mL的霉菌至霉菌培养基上，待菌长满后，实验组1、2分别喷洒水浴锅抑菌剂（abs9371）、培养箱除菌剂（abs9372）、细胞房除菌剂（abs9373）、水盘抑菌剂（abs9374），实验组3喷洒无菌水。
喷洒试剂前
喷洒试剂等待24h后
与常见清洁试剂对比：
清洁试剂
优劣势
酒精
有刺激性气味，只能用于擦拭物体表面，不可以用于水盘和水浴锅，且只能抑制微生物生长，不能杀灭，要杀灭需要长时间浸泡，已经污染真菌的实验室用酒精消毒效果不明显
甲醛
有刺激性气味有毒致癌
饱和硫酸铜
只能用于水盘且有腐蚀性
新洁尔灭
苯扎溴铵，对革兰阳性细菌作用较强，但对绿脓杆菌、抗酸杆菌和细菌芽孢无效
84消毒液
次氯酸钠，有一定的刺激性与腐蚀性，有挥发性。
发酵产品、无气味、无刺激性、无毒性、热稳定、无挥发性、安全环保。具有广谱和高效性，对真菌和细菌都有杀灭作用。
保卫细胞，消灭支原体
比杂菌污染更棘手的则是支原体污染，它也是是细胞培养领域的一个世界性问题，世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体的直径约为 0.1-0.3μm，这也就意味着它们可以透过常见的滤膜（0.22-0.45μm），因此常规的无菌过滤方法不能将其去除，而常用的抗生素也对支原体无效。
当支原体污染发生后，它们不会使细胞死亡，甚至能与细胞长期共存，也不会使培养基发生浑浊，细胞外观上看起来也不会有明显变化，实际上却埋下了“隐疾”。支原体在潜移默化中悄悄引起细胞变形，影响DNA合成，抑制细胞生长，竞争营养，分泌有害代谢产物，迅速降低培养液中的葡萄糖，形成酸从而改变Ph值；消耗精氨酸、抑制蛋白合成、细胞分裂减慢、停止生长等，最终影响实验结果。
Absin支原体清除试剂&预防试剂
有效成分
多肽
工作原理
1、支原体和细菌带负电荷，多肽带正电荷，互相吸引。
2、多肽作用于支原体细胞膜，使其穿孔，改变渗透压。
3、支原体对渗透压敏感，渗透压的突变可致细胞破裂死亡。
优势
1、相较于抗生素类，本品无耐药性
2、无二次污染，随着培养时间的延长，会被缓慢降解为氨基酸
3、细胞毒性小，已在多种细胞上进行过验证
区别
·100%清除支原体的污染；
·完全清除支原体，只需3-6天；
·清除血清、培养基中支原体污染；
·100%预防支原体的污染；
·广谱性，替代双抗；
·用于预防血清、培养基污染；
·用于发酵、细胞治疗等领域；
使用范围
污染后清除支原体，部分敏感细胞，推荐1:2000处理6天
培养之前预防支原体污染
案例：
清除猪IPEC-J2细胞中的支原体
支原体清除剂（abs9375）处理猪IPEC-J2细胞3天后，采用Hocest33342染色法对处理前后的细胞进行染色。
Absin支原体清除试剂与抗生素类清除试剂对比
400bp左右有条带的为支原体污染。下图是被支原体污染后经支原体清除剂（abs9375）（9、10 条带）和抗生素类试剂（11、12）处理后效果的对比。
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WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
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