mRNA转染利器- jetMessenger

发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2022/8/12 10:32:17

mRNA 转染是一种新的解决方案，适用于各种难以用质粒 DNA 转染的细胞，包括贴壁细胞（神经元或原代细胞）和悬浮细胞（淋巴细胞）。与 DNA 转染相比，该过程具有许多优点：转染细胞的百分比高，转染后蛋白质表达速度更快，与质粒或病毒载体相比，没有插入诱变的风险。实际上，mRNA 在细胞质中传递和表达，不需要穿过核膜，这是质粒转移的限制步骤之一。此外，最新一代修饰的 mRNA 降低了通常由 mRNA 进入胞质溶胶诱导的毒性和免疫反应 (1, 2)。 mRNA 转染的瞬时特性对于许多应用来说是理想的，包括细胞重编程、基因组编辑 (CRISPR/Cas9) 和疫苗。 Polyplus-transfection® 开发了一种新型 mRNA 转染试剂 -jetMESSENGER®，其效率优于 DNA 转染效率。

Fig1. Mechanism of transfection of jetMESSENGER

接下来小编好好给你介绍一下

1.无可比拟的转染效率：mRNA转染优于DNA转染效率

Fig2.在用 jetMESSENGER® 转染 EGFP mRNA (L-6101, Trilink™) 或用 Lipofectamine® 2000 转染 EGFP (pCMV-EGFP) 的质粒 DNA 转染 24 小时后，通过 FACS 分析在癌细胞系中测定转染效率。

Fig3.转染后 24 小时，通过荧光显微镜在 Hep G2 细胞中测定 GFP 表达。在使用jetMESSENGER® 转染期间保持细胞形态。

jetMESSENGER® 优于竞争对手的DNA和mRNA转染产品:

Fig4.在用 jetMESSENGER® 或 Lipofectamine® MessengerMax™ 转染 EGFP mRNA (L-6101, Trilink™) 24 小时后，通过 FACS 分析在悬浮细胞中测定转染效率。

2.对多种难转染细胞有效：适用于缓慢分裂的处于静止期的原代细胞/干细胞

Fig5.在用 jetMESSENGER® 转染 mRNA 后，通过荧光显微镜在各种细胞系中测定 GFP 表达

3.对细胞极其温和：维持良好的细胞活率

Fig6.a.在用 jetMESSENGER® 转染 EGFP mRNA (L-6101, Trilink™) 或用 Lipofectamine® 3000 转染 EGFP (pCMV-EGFP) 的质粒 DNA 后 24 小时或 48 小时，通过 FACS 在人星形胶质细胞中分析 GFP 表达。b.在用 jetMESSENGER® 或 Lipofectamine® MessengerMaxTM 转染 EGFP mRNA（L-6101，Trilink™）后 24 小时、48 小时、72 小时或 96 小时，通过 FACS 在人成纤维细胞中分析 GFP 表达。

Fig7.通过荧光显微镜在各种来源的人类癌细胞、MDA-MB-231（乳腺细胞）和 SW1353（人类骨成纤维细胞）中测定 GFP 表达。

4.适合众多应用：可用于基因表达，CRISPR基因编辑，iPS诱导和其他应用

接着我们来看看-jetMessenger在神经元转染上的具体应用

为了提高功能和生化分析等不同应用的转染效率，在不同类型的神经元和神经胶质细胞中转染了 eGFP mRNA。如Fig8所示，获得了高于40% 的海马和皮质大鼠原代神经元的高转染率。此外，从 iPS 细胞获得的多巴神经元实现了高转染效率，结果表明jetMESSENGER® 是研究重编程和分化的非常强大的工具。对于人类正常的星形胶质细胞，获得了几乎 100% 的转染效率（Fig.8）。

Fig8. 使用 jetMESSENGER® 转染不同类型的神经元。 (A) 用 jetMESSENGER® 转染编码 eGFP (EGFP-mRNA) 的 mRNA，并通过荧光显微镜评估转染后 4 小时的 eGFP 表达。 (B) 星形胶质细胞转染后 24 小时通过流式细胞仪分析评估转染效率。对于皮质、海马和多巴神经元，使用荧光细胞成像仪进行荧光显微镜分析。