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一篇文章带你了解神经细胞

发布人:上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2022/7/11 15:53:08

神经发生发生在哺乳动物发育的不同阶段。中枢神经系统(CNS)的发展始于神经外胚层的诱导,形成神经板,然后是神经管。神经管的尾部区域产生脊髓,喙部区域成为大脑。在神经发育的早期阶段,细胞迅速分裂。未成熟的神经元从细胞增殖区迁移到其最终位置,并开始扩展神经突起以与其他细胞形成接触。产前发育后,神经发生仅限于侧脑室侧壁的脑室下区和成年哺乳动物脑齿状回的粒下区域。在那里,神经干细胞在一生中不断产生新的神经元。

中枢神经系统中的神经细胞
中枢神经系统包括两类主要细胞:神经元和神经胶质细胞。神经元接收,处理和传递信息,而神经胶质细胞通过维持体内平衡,形成髓鞘,提供营养,破坏病原体和去除死亡神经元等功能来支持和保护神经元。在脊椎动物中,神经胶质细胞的数量超过神经元的10-50倍,并分为小胶质细胞和大胶质细胞。中枢神经系统中两大胶质细胞是星形胶质细胞和少突胶质细胞。

1.1 神经细胞的类型和标志物
神经干细胞
神经发生持续存在于哺乳动物成年大脑的两个区域:外心室侧壁的脑室下区和齿状回的粒下区域。这些区域的成体神经干细胞(NSC)具有在整个生命中自我更新和产生新神经元的能力。NSC是星形胶质细胞的一个亚群,因此表达特征性星形胶质细胞标志物,如GLAST和GFAP。

神经元
哺乳动物的大脑包含1亿到1000亿个神经元,具体取决于物种。神经元是电激发的细胞,通过动作电位和神经递质将信息传递给其他神经元或其他细胞类型。根据接收细胞上的神经递质和受体,信号可能是兴奋性的或抑制性的。神经元表现出广泛的形态学和生理异质性,并且缺乏特异性的泛细胞表面标记物,使得泛神经元细胞只能通过标记非神经元细胞来间接地被识别和分离。

星形胶质细胞
星形胶质细胞是CNS中最丰富的细胞类型,具有广泛的形态和功能异质性。星形胶质细胞调节离子和谷氨酸稳态,控制突触的数量和功能,有助于伤口愈合,形成血脑屏障,调节脑血流量。星胶质细胞在外心室外壁的脑室下区和齿状回的粒下层中也充当成体神经干细胞。GLAST是发育中和新生儿哺乳动物中枢神经系统中最丰富的谷氨酸转运蛋白和特异性星形胶质细胞标志物。桡骨神经胶质细胞和干细胞也表达GLAST。ACSA-2 抗原在 GLAST阳性星形胶质细胞上特异性表达,是第二种星形胶质细胞特异性表面标志物,抗ACSA-2靶向的抗原是ATP1B2。
 
少突胶质细胞
少突胶质细胞形成神经元轴突周围的髓鞘,这有利于动作电位的快速盐分传播。根据表达的特异性标志物,已经在体内和体外鉴定出少突胶质细胞的几个不同的表型发育阶段。仅凭形态学标准通常不足以表征每个阶段。少突胶质细胞前体细胞(OPCs)是小的,圆形的,具有活性增殖和迁移特性的工艺细胞。它们在体外用抗A2B5抗体鉴定,该抗体识别几种神经节苷脂。然而,这种抗体也在体内标记其他细胞类型,因此使用更特异性的标志物,例如血小板衍生的生长因子受体α(PDGFRα - 跨膜受体酪氨酸激酶)和单膜跨越硫酸软骨素蛋白聚糖NG2(AN2)。这些是体内OPCs最可靠的标记物,也用于标记成年OPC。当OPCs开始分化时,它们表达一种称为POA(前少突胶质细胞抗原)的硫酸化表面抗原,该抗原被抗O4抗体识别。在少突胶质细胞发育过程中,O4 表达始于晚期 A2B5 阳性的少突胶质细胞祖细胞。当 A2B5 表达消失时,O4 表达继续。当细胞分化时,它们合成半乳糖蜡笔苷,髓鞘碱性蛋白(MBP),蛋白脂蛋白(PLP),髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)和O1。

小胶质细胞
小胶质细胞(脑巨噬细胞)是中枢神经系统的常驻免疫效应细胞。活化的小胶质细胞也作为抗原呈递细胞。它们在形态学上,免疫表型上和功能上与单核细胞/巨噬细胞系的细胞相关,其特征在于CD11b在人和小鼠中的表达(大鼠中的CD11b/c),CD68,F4 / 80和MHC II类。

1.2神经组织的样品制备
神经细胞样本可以从整个大脑,大脑区域或脊髓获得。表征神经细胞的下游应用可能需要事先制备样品,例如组织解离,以产生单细胞悬浮液。

用于制备神经组织样品的产品如下:

功能
组织处理产品
备注
将神经组织解离成单细胞悬浮液,无碎屑和红细胞(RBC)
动物年龄>P7;使用优化的酶混合物进行酶解离,并含有碎片和红细胞去除溶液
将神经组织解离成单细胞悬浮液
动物年龄≤P7;使用木瓜蛋白酶解离
将神经组织解离成单细胞悬浮液
动物年龄≤P7;使用胰蛋白酶解离
脑肿瘤组织的解离
使用木瓜蛋白酶解离
培养的神经球体解离
使用木瓜蛋白酶解离
体外产生的胚体解离
 
髓鞘去除
用于单细胞悬浮液
组织解离C
C管
过滤
滤器


 神经元和神经元前体细胞的分离的产品

分选产品
样品
对于与神经组织解离试剂盒 - 产后神经元或成年脑解离试剂盒解离的新生儿或成年小鼠大脑解离,小鼠,大鼠
对于与神经组织解离试剂盒(T)解离的新生小鼠大脑
对于与神经组织解离试剂盒(T)解离的新生儿小鼠或大鼠脑


星形胶质细胞的分离产品

分选产品
样本
解离的新生儿或成年小鼠大脑
对于与神经组织解离试剂盒(T)解离的新生儿小鼠或大鼠脑
基于PBS的缓冲液经过优化,可在分离成年星形胶质细胞期间去除死细胞


少突胶质细胞谱系细胞的分离产品

分选产品
样本
使用新生儿小鼠脑
使用新生儿小鼠脑;需要抗原的再表达
使用新生儿小鼠脑
使用新生儿或成人小鼠或大鼠大脑


小胶质细胞的分离产品

分选产品
样本
使用新生儿或成年小鼠大脑
使用新生儿或成年大鼠脑


不同神经细胞流式检测的marker总结

细胞
Marker
星形胶质细胞
GLAST (EAAT1), ACSA-2, GFAP, ALDH1L1, S100β
成熟/过早少突胶质细胞
O4, AN2(NG2), PDGFRα(CD140a), A2B5, MOG, MAG, PLP, MBP, O1
小胶质细胞
CD11b 或 CD11b/c、CD68、F4/80、CD45、IBA1
神经元
MAP2, TuJ1, NeuN, β-III 微管蛋白, NFH, CD171 ( L1CAM)
神经元干细胞/前体细胞
PSA-NCAM

 


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