脾脏组织简介及样本制备

发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2022/5/17 14:18:31

一、介绍
脾是淋巴系统的器官，它负责启动对血源性抗原的免疫反应，并过滤血液中的外来物质和陈旧或受损的血细胞。这些功能发生在脾脏的两个主要腔室:脾脏的白髓及其边缘区和红髓。根据它们不同的功能，这两个室在形态和细胞组成上各不相同。
红髓是一个血液过滤器。它控制体内红细胞的数量，并储存红细胞和血小板。健康的红细胞在脾脏内通过狭窄的通道，而衰老和受损的红细胞被清除和消化，以循环血红蛋白中的铁和蛋白质成分。在啮齿类动物中，红髓是造血的部位。
白髓由淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞和浆细胞组成。免疫细胞破坏过滤过的病原体并产生相应的抗体。在感染期间，脾脏可能由于白细胞数量的增加而增大。

二、细胞亚群分布及标志物
鉴于其在淋巴系统中的作用，脾脏拥有广泛的血细胞，包括红细胞和白细胞，以及死亡细胞、细胞碎片和血小板。在了解参与免疫反应的细胞亚群及其功能机制方面，脾脏是多种免疫细胞亚型的良好来源。

表1 脾脏中的细胞亚型

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细胞类型

占总细胞比例(%)

Markers

功能

T cells

21–25

CD90, CD3, CD4, CD8

适应性免疫反应

B cells

44–58

CD19, CD45R/B220

抗体和细胞因子分泌；抗原呈递

Monocytes

3.5–5

CD11b, CD115, CCR2, Ly6C

迁移至感染部位；分化成巨噬细胞或树突状细胞

Granulocytes

1–2

CD11b, Ly6C, SiglecF, CD49b, CD193

参与炎症部位的反应；破坏病原体；募集免疫细胞

Dendritic cells

1–3

CD11c, MHCII, XCR1,

可以激活免疫反应

Natural killer cells

1–2

NKp46, NK1.1

在MHC上没有抗原提呈的情况下识别并摧毁感染细胞

Marcophages

1–2

F4/80

吞噬细胞碎片、微生物、癌细胞等

三、样本制备
使用70μm的MACS SmartStrainer剪切组织，很容易将淋巴细胞从脾脏中释放出来，以便后续分离。然而，为了分离组织驻留细胞，如树突状细胞和巨噬细胞，组织必须被酶和机械地分解，以释放浸润细胞。粗消化酶的活性各不相同。根据所使用的酶，细胞表面抗原表位可能发生裂解，这将影响下游实验的性能，包括细胞分选、流式分选和流式细胞术分析。使用经过验证的酶确保了下游实验中组织分离的重复性和质量。将MACS全自动组织处理器和MACS 组织解离管（C管）与小鼠脾组织解离试剂盒结合，可以快速、轻松地从小鼠脾脏中生成含有大量白细胞(包括树突状细胞)的单细胞悬液。此外，酶的批次间的一致性和机械解离步骤的自动化确保了每次结果的可重复性和高质量的下游分析。

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货号

名称

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130-096-427

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