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发布人：杭州斯达特生物科技有限公司
发布日期:2026/11/7 11:12:37
磁珠法纯化不难，难在细节。磁珠没活化、洗涤液忘了加乙醇、残液没吸净，回收率就往下掉。这份流程按上机顺序走了一遍，照着做基本不会出错。50 μL 的体系，你的磁珠加够了吗？
本试剂盒适用于PCR反应后去除引物、酶、矿物油、甘油、盐等杂质；也同样适用于酶切、连接、磷酸化、补平或切平、随机引物等反应后的DNA纯化。所得纯化后DNA可直接用于酶切、连接、转化、测序、PCR、杂交等后续实验。
其核心原理是利用新型核酸纯化介质包被的磁珠，在特定缓冲液条件下选择性结合DNA，而蛋白质、盐类及其他杂质不被吸附。通过磁分离装置将磁珠聚集后，杂质随残液被去除再用洗涤缓冲液进一步清洗，最终用洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来，获得高纯度的DNA样品。
这一方法避免了传统柱式纯化中的离心和过柱步骤，操作更为简便，且适合自动化操作。
图片来源：斯达特官网技术软文
本试剂盒以50 μL PCR/DNA样品纯化回收为标准提供相应试剂和磁珠。使用本试剂盒需自备无水乙醇和磁分离装置。
本产品提供的洗脱液为DNase/RNase-free water。如需使用洗脱缓冲液，可根据以下配方自行配置：10 mM Tris-HCl，pH8.0。
第一次使用洗涤缓冲液前，需按照说明书加入指定量的无水乙醇，混匀，并在瓶身做好标记，室温密闭存储。这一步骤很关键：洗涤缓冲液中的乙醇浓度直接影响杂质去除效率，未加入乙醇的洗涤缓冲液无法有效去除盐类残留。
磁珠悬液在静置后会发生沉降，使用前一定要涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。磁珠保存液会影响纯化回收效率，使用前需要活化磁珠。
磁珠活化是保证纯化效率的关键预处理步骤。根据样品数量（n）和推荐的磁珠用量，取出对应体积的磁珠溶液（5n），加入等体积的洗脱液充分混匀，使用磁分离装置去除洗涤后液体。重复一次上述操作，再加入与磁珠溶液等体积的洗脱液混匀磁珠备用。
活化的目的是去除磁珠保存液中的成分，这些成分可能干扰DNA与磁珠的结合，降低回收效率。活化后的磁珠应立即使用，避免长时间放置导致性能下降。
DNA 结合
向样品管中分别加入300 μL 结合缓冲液和活化后磁珠5 μL，使用移液枪充分吹打混匀，室温静置5分钟，使磁珠与核酸充分结合。如有必要，可适当延长结合时间以提高得率。吹打混匀时应避免产生气泡，确保磁珠与DNA充分接触。
磁分离与残液去除
将样品管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸除残液，避免吸到磁珠，影响后续回收得率。磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象，可以在磁珠聚集后晃动管内液体，使挂壁的磁珠流下。
洗涤
加入300 μL 洗涤缓冲液，使用移液枪吹打混匀使磁珠分散，将样品管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸除残液。重复此操作，尽量吸净残留液体。室温静置3-5分钟，使残留的乙醇完全挥发，避免影响后续实验。乙醇残留会抑制酶切、连接等下游酶促反应，因此挥发步骤不可省略。
加入30-50 μL 洗脱液，使用移液枪吹打混匀，将磁珠悬于溶液中，室温孵育2分钟。将样品管置于磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸取溶液至新离心管中，置于-20℃保存，所得溶液即为DNA样品。
为提高样品浓度，也可适当减少洗脱液用量，但不应低于磁珠溶液用量的3倍，避免洗脱不完全。可将洗脱液在金属浴或水浴锅中提高温度到65℃洗脱，比室温洗脱效率略高。高温有助于DNA从磁珠表面解离，提高回收率。
结合缓冲液在温度较低时可能会有沉淀产生。使用前务必检查，如有沉淀，可置37℃水浴加热溶解，混匀后使用。室温密闭保存，避免强光直射。
结合缓冲液对人体有一定的刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。本产品适用于手工抽提，也可用于工作站或核酸自动提取仪，具备良好的平台兼容性。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本篇表格 1 款：S0F6001 斯达特磁珠法PCR/DNA纯化回收试剂盒，￥250，现货。按 50 μL 的 PCR/DNA 样品纯化回收配制，自备无水乙醇和磁分离装置即可上机。
| 货号 | 产品名称 | 商品参数 | 参考货期 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|---|---|
| S0F6001 | 斯达特磁珠法PCR/DNA纯化回收试剂盒 | 现货 | ￥250 |
数据来源：斯达特（Starter）官网产品页 S0F6001，信息检索时间2026-11-07
磁珠法的回收率，八成取决于前面几步：磁珠活化、乙醇有没有加、残液吸不吸得干净。洗脱体积别低于磁珠溶液的 3 倍，浓度才稳。乙醇没挥发干净，后面的酶切和连接会莫名其妙失败。你上一次回收率偏低，卡在哪一步？
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