ASAP进样器，不同进样模式下消耗样品体积

PushFull进样模式

AS-AP从样品小瓶或孔板中抽取样品后，将有一部分样品首先被冲入样品传输管路，一部分样品然后被充满定量环。定量环之前仍存有多余样品，定量环中的样品被注入色谱柱。PushFull进样时抽取的样品体积：

LoopVolume× LoopOverfill + 30μL 

式中：LoopVolume是安装在进样阀上定量环的尺寸。Chromeleon配置中Options页输入定量环体积。 LoopOverfill是进样前通过定量环的样品体积。默认因子是5，表明定量环被清洗4次，再充满。在仪器方法或程序中输入LoopOverfill因子。 30μL是最初清洗时通过样品传输管路的体积，加上定量环之前残留的体积。

例如：

• Loop volume = 10μL

 • Loop overfill factor = 5.000 

10μL × 5.000 + 30μL = 80μL

PushPartial进样模式

AS-AP从样品小瓶或孔板中抽取一定体积的样品。一部分样品首先被冲入样品传输管路。注入的样品加载至定量环。额外的样品仍留在定量环之前的管路。定量环中的样品被注入色谱柱。序列中的进样体积决定了进样量。无需安装不同的定量环以改变进样体积。

PushPartial进样时的样品量：

InjectionVolume + (2 × PartialCutVolume) 

式中： • InjectionVolume 必须小于定量环体积的一半。在序列中输入进样体积。• PartialCutVolume是进样过程中样品两端被“cut”的体积(或忽略的)。样品的中间部分位于定量环中，并被注入。在仪器方法或程序中输入部分cut体积。利用更小的部分cut体积最大程度减小抽取的总样品量。但是，大的部分cut体积会得到更好的精度。

例如：

 • Injection volume = 4μL (定量环体积是10μL) 

• Partial cut volume = 5 

4μL + (2× 5μL) = 14μL

PushPartial_ls(limited-sample)进样模式

 定量环部分样品加载至色谱柱，无额外样品。序列中的进样体积决定了进样量。无需安装不同的定量环以改变进样体积。

PushPartial_ls进样量： InjectionVolume 

式中： InjectionVolume小于定量环体积的一半。在序列中输入进样体积。

PushConcentrate进样模式

AS-AP抽取样品并输送至浓缩柱。

PushConcentrate进样量： InjectionVolume 。

 式中：InjectionVolume在序列中输入。

PushCap进样模式

毛细管系统中，满环样品被载入色谱柱。

进样序列与PushFull进样模式相同。

PushCap进样量：

LoopVolume × CapillaryOverfill + 3μL 

式中： • LoopVolume是定量环的体积。在Chromeleon配置的Options页输入定量环体积。毛细管系统中，进样阀中固定的内置定量环体积为0.4μL。• CapillaryOverfill是进样之前通过定量环的样品体积。默认因子是50，表明定量环被清洗49次，再充满。

在仪器方法或程序中输入定量环overfill因子。

• 3μL是最初清洗并通过样品传输管路的样品体积，加上定量环之前管路中残留的体积。 例如：

 • Loop volume = 0.4μL 

• Loop overfill factor = 50.000 

0.4 μL × 50.000 + 3μL = 23μL

PushSequential进样模式

当配置为push顺序进样模式，AS-AP输送样品至两个单独的色谱系统。每个系统独立运行，可设不同的样品和进样体积。Push模式下所有可选的进样模式均适用于push顺序进样模式。

注意：在push顺序模式下进行部分进样时，推荐使用大cut体积，有利于提高精度。

PushSimultaneous进样模式

AS-AP从样品瓶中抽取指定体积的样品，并将相同体积的样品输送至两个系统的进样阀。满环样品同时加载至两个系统的色谱柱上。通过两个系统的流路必须相同。利用以下公式计算PushSimultaneous进样需要的样品量，并在序列中输入该进样体积： 

Connector Tubing Volume + ((Loop Volume #1 + Loop Volume #2) × 5) + 50μL

• Connector Tubing Volume是进样口至每个进样阀的管路体积，包括进样口至三通及每个系统的管路。利用下面的公式估算连接管路的体积：

(从进样口至三通的管路长度mm +至进样阀的管路长度#1 mm +至进样阀的管路长度#2 mm) ×((管子内径mm /2)2) × 3.14159

• Loop Volume #1和Loop Volume #2是安装在每个进样阀上的定量环体积，在Chromeleon配置的Options页输入定量环体积。• 50μL是最初清洗通过样品传输管路的样品体积，加上残留在定量环前面管路的体积。

例如： 

• 进样口至三通的管路体积：250 mm，0.33 mm (0.013英寸)PEEK管路内径= 21 μL

• 三通至进样阀的管路体积：762 mm，0.33 mm (0.013英寸)PEEK管路内径×2 = 66 μL × 2 = 131μL

注意：为了估算内径为0.33 mm (0.013英寸) PEEK管路的体积(蓝色)，可使用换算因子0.86μL/cm(2.2μL/英寸)。

• Loop volume #1 = 10 μL

• Loop volume #2 = 25 μL

152 μL + ((10 μL +25μL) × 5)) + 50μL = 377 μL 

本例中，AS-AP从小瓶中抽取377μL 样品，并等量传输至两个样品定量环，这取决于两个系统的反压。

PullFull进样模式

满环样品加载至色谱柱。Pull模式一般比push模式需要更多样品，但比push模式快速。

PullFull进样量： FlushVolume + (LoopVolume × LoopOverfill) 

式中：

• FlushVolume是清洗针和样品传输管路的样品体积。推荐体积为：2 × (Needle Volume + Sample Transfer Line Volume)。在仪器方法或程序中输入清洗体积。

• LoopVolume是定量环体积，在Chromeleon配置的Options页输入定量环体积。• LoopOverfill是进样前经定量环抽取的样品体积。默认因子是5，表明定量环清洗4次，再被充满。

在仪器方法或程序中输入LoopOverfill因子。

例如：

 • Needle volume = 30 μL 

• Sample transfer line volume = 22 μL (254 mm，0.33 mm (0.013 in) ID PEEK tubing) 注意：为了估算内径为0.33 mm (0.013英寸) PEEK管路的体积(蓝色)，使用换算因子0.86μL/cm(2.2μL/英寸)。

• Loop volume = 10 μL 

• Loop overfill factor = 5 

(2×(30 μL + 22 μL)) + (10 μL × 5) = 154 μL 

其余PullFull进样模式，从相同样品瓶中取样，需要的样品量： Flush Volume 2 + Loop Volume × Loop Overfill

首次进样，Flush Volume 2可小于清洗体积(认为进样之间无清洗循环)。推荐等于或大于进样针体积(例如，30-40μL)。在仪器方法或程序中输入Flush Volume 2

PullPartial进样模式

非满环进样。序列中指定的进样体积确定了进样体积。无需安装不同的定量环改变进样体积。

PullPartial进样模式的进样量：

 Flush Volume + Injection Volume 

式中： • Flush Volume是清洗针和样品传输管路的样品体积。推荐体积为：2 × (Needle Volume + Sample Transfer Line Volume)。在仪器方法或程序中输入清洗体积。• InjectionVolume 是序列中的输入值