Pimozide：多靶点机制揭示运动障碍与抗肿瘤新策略

■ 1. 背景介绍

▲ Pimozide (T2546)，CAS: 2062-78-4的化学结构式

Pimozide (T2546)，CAS: 2062-78-4 是二苯丁基哌啶类多受体拮抗剂，常用于研究多巴胺、肾上腺素能、5-HT2、钾通道与STAT等通路。其核心作用为选择性拮抗中枢D2受体，阻断Gi/o介导的腺苷酸环化酶抑制，恢复cAMP/PKA张力，影响电压门控Ca2+通道与GIRK电流，并重塑β-arrestin/ERK分支，由此削弱多巴胺能神经传递；在行为范式中，这与运动/发声抽动样输出及与寄生虫感知错配相关现象的降低相一致[1]。此外，Pimozide 拮抗α1肾上腺素能受体与5-HT2受体（主要为Gq/11偶联），抑制PLCβ→IP3/DAG→Ca2+/PKC轴，从而用于解析去甲肾上腺素与5-HT在兴奋性与可塑性中的协同与分工，便于通过剂量与联用设计区分D2特异与α1/5-HT2相关效应。

在离子通道层面，Pimozide 常作为Kv11.1/hERG 参考阻断剂用于电生理与再极化动力学研究，刻画通道药理与药物–通道相互作用。于细胞信号研究中，Pimozide 亦被用作STAT通路的小分子调制剂，可抑制STAT活化及其转录程序，为探究JAK–STAT依赖性、靶基因调控与反馈网络提供化学工具[2]。综上，Pimozide 兼具：① D2→cAMP/PKA、离子通道与ERK节点的干预；② α1与5-HT2的Gq/PLCβ/IP3/DAG/PKC级联抑制；③ 钾通道门控与再极化的解析；④ STAT驱动转录的化学抑制。基于此，研究者可量化受体占有–效应关系，剖析多通路并行下的耦联与串扰，并在运动控制、显著性赋值与躯体感觉计算等体系中，以Pimozide 的D2拮抗为基准框架开展跨层级读出（第二信使、磷蛋白组、基因表达与电生理）的一致性验证[1,2]。

■ 2. 文献分享

■ 2.1 Chronic stress accelerates glioblastoma progression via DRD2/ERK/β-catenin axis and Dopamine/ERK/TH positive feedback loop

▲ 慢性不可预测温和应激（CUMS）与慢性束缚应激（CRS）两种慢性压力模型对裸鼠颅内胶质瘤进展的促进作用。 A 动物整体实验方案：小鼠适应性饲养后分别给予 4 周 CUMS、3 周 CRS 应激，定期称重、行为学检测，颅内荧光素酶标记胶质瘤细胞造模，每 7 天活体生物发光成像，28 天后取材检测。 B、C CUMS 与 CRS 模型小鼠体重变化、糖水偏好实验（SPT）、强迫游泳实验（TST）结果：应激组出现体重轻微下降、糖水偏好降低、不动时间延长，证实抑郁样焦虑行为表型构建成功。 D 血浆与胶质瘤组织应激指标定量：CUMS、CRS 应激组血浆及肿瘤组织皮质酮、ACTH 水平显著升高，下丘脑 - 垂体 - 肾上腺（HPA）轴过度激活。 E 第 7/14/21/28 天活体生物发光成像：CUMS、CRS 应激组肿瘤荧光信号随时间显著强于对照组。 F 荧光强度定量统计：两种应激均时间依赖性提升颅内肿瘤负荷。 G CRS 组脑组织 HE 染色与肿瘤体积统计：应激组胶质瘤病灶体积显著增大。 H Ki67 增殖免疫荧光：应激组 Ki67 阳性增殖细胞比例明显高于对照组，提示压力促进肿瘤细胞增殖。 I Kaplan-Meier 生存曲线：CUMS、CRS 慢性应激均显著缩短荷瘤小鼠生存期，Log-rank 检验 p 值具有统计学意义。*、**、*** 代表统计学差异。

Pimozide (T2546) 被明确为DRD2特异性抑制剂，并在胶质母细胞瘤模型中评估其单独使用及与替莫唑胺联合使用的效果。体外实验中，对Pimozide与替莫唑胺的组合进行了组合指数评估，U87与U251细胞的CI值均显著小于1，显示两药的抑制作用存在协同。于携瘤小鼠模型中，单用Pimozide即可显著延缓肿瘤生长，而与替莫唑胺联用在对照组与慢性压力组均表现出最为明显的抑制效果。进一步地，在裸鼠颅内移植模型中，Pimozide与替莫唑胺联用较任一单药均能显著延长中位总生存期。以上结果共同表明，Pimozide作为靶向DRD2的化合物，不仅具有抑制肿瘤生长的活性，而且与替莫唑胺联用在体外表现出明确的协同效应，并在体内带来更强的肿瘤抑制与生存获益。[3]

■ 2.2 Identification of FDA-Approved Drugs That Inhibit SARS-CoV-2 and Human Norovirus Replication

▲ 五种化合物对 3CL^pro 蛋白酶体外酶活抑制剂量 - 效应曲线及半数抑制浓度 IC₅₀测定。 横坐标为药物浓度对数 log₁₀[M]，纵坐标为残余蛋白酶相对活性百分比。

金硫葡糖（Auranofin）：强效抑制剂，IC₅₀ = 0.2 μM，浓度依赖性显著抑制 3CL^pro 酶活；

内昔芬（Endoxifen）：中等抑制活性，IC₅₀ = 72.4 μM；

Netupitant：在最高测试浓度下无明显抑制作用，IC₅₀ ＞ 200 μM；

匹莫齐特（Pimozide）：弱抑制活性，IC₅₀ = 722.9 μM；

瑞戈非尼（Regorafenib）：全程无抑制效果，IC₅₀ ＞ 500 μM。 结果表明 Auranofin 为靶向 3CL^pro 最具潜力的小分子抑制剂。

Pimozide (T2546) 在细胞FlipGFP-3CLpro检测与体外荧光法3CLpro检测中均表现出对SARS-CoV-2 3CLpro活性的剂量依赖性抑制。进一步滴定结果显示，Pimozide 以剂量依赖方式抑制3CLpro活性，其IC50较低（小于10 µM），且仅在最高给药浓度下出现中等细胞毒性。在培养细胞感染实验中，Pimozide 以剂量依赖方式抑制SARS-CoV-2复制。对比生化与细胞水平活性表明，Pimozide 针对3CLpro活性的IC50高于其抑制SARS-CoV-2复制的IC50，二者相差75倍。此外，Pimozide 对人诺如病毒复制具有显著抑制作用。以上结果共同表明，Pimozide 在细胞与纯化酶条件下均可直接抑制SARS-CoV-2 3CLpro，并能降低SARS-CoV-2在细胞内的复制，同时对人诺如病毒复制也展现出强力抑制效应，而细胞毒性仅在最高浓度时为中等水平。[4]

■ 2.3 Pimozide Inhibits CatSper Activity, Impairs Hyperactivation and the Acrosome Reaction in Human Spermatozoa.

▲ 蛋白 - 小分子复合物分子动力学模拟体系与 500 ns 均方根偏差（RMSD）稳定性分析。 (a) 分子模拟初始构象：青色为目标蛋白三维结构，红色为结合口袋内小分子配体，两侧棕色为膜环境，外层透明立方体为周期性水盒子模拟溶剂环境。 (b) 500 纳秒模拟过程中 4 个体系的 RMSD 随时间变化曲线，纵坐标为 RMSD 值（nm），横坐标为模拟时长（ns）。所有体系在模拟中后期均达到动态平衡、曲线平稳波动，说明蛋白 - 配体复合物构象在水溶液体系中结构稳定，结合状态可靠；不同颜色曲线代表不同实验组 / 突变体 / 配体复合物，基线波动差异反映各自构象柔性区别。

Pimozide (T2546) 通过计算与实验手段被评估其作为CatSper孔道阻断分子的潜力。分子对接与分子动力学模拟显示其与CatSper孔道存在有利相互作用，最佳构象对接得分为−10.9 kcal/mol；在500 ns模拟中始终停留于孔道内，并在350 ns后呈现稳定复本。预测结合模式包括稳定的疏水接触以及多次复本中出现的氢键，MM-GBSA评估给出有利的结合能（−109.856 kcal/mol）。在功能层面，Pimozide 使人类精子获得高活化的比例随剂量增加而下降，并以2.92 µM的IC50呈剂量反应关系。在10 µM条件下，即便存在孕酮，暴露于Pimozide的精子其顶体反应水平与对照组保持一致，表明其降低了孕酮诱导的顶体反应。在经验证的CatSper相关活性评估中，非获能条件下经Pimozide处理的精子对螯合诱发的膜电位变化反应显著降低。所测得的IC50与其他CatSper拮抗分子相当。上述对接/动力学与能量评估结果，结合对高活化、顶体反应与膜电位指标的实验观察，共同支持Pimozide 对与CatSper相关的人类精子功能产生一致的抑制作用。[5]

■ 2.4 Treatment non-persistence in children and adolescents with Tourette syndrome newly treated with dopamine D2 receptor modulators.

▲ 随访 18 个月内，整体 D2 受体拮抗剂（Any D2RA）、利培酮（Risperidone）、阿立哌唑（Aripiprazole）三组患者持续用药留存率折线图。 横坐标为基线（Index）至第 18 个月（M1–M18）随访时间点，纵坐标为仍继续用药患者占比（%）。所有组别均在第 3 个月出现留存率大幅断崖式下降；全程来看，任意 D2 类受体拮抗剂整体患者留存比例始终显著高于利培酮单药、阿立哌唑单药；阿立哌唑长期随访患者停药脱落率最高，18 月末留存率仅 6.1%，利培酮为 7.2%，整体 D2 拮抗剂组仍有 17.9% 患者坚持治疗，反映不同抗精神病药物长期治疗依从性存在明显差异。

Pimozide (T2546) 在本文中被明确归类为多巴胺D2受体拮抗/部分激动剂。作者将其置于具有多巴胺D2受体调节特性的化合物范畴之内，并指出其属于美国食品药品监督管理局核准用于抽动秽语综合征的药物之一。上述表述界定了Pimozide在受体水平上的作用类别，并给出了其在抽动秽语综合征领域的监管属性。研究的整体框架围绕具有D2受体活性的化合物展开，而Pimozide被作者明确纳入该类化合物以及相应监管类别之中。文中关于Pimozide的描述集中于其作为多巴胺D2受体拮抗/部分激动剂的机制属性与其在抽动秽语综合征方面的已获批地位。[6]

■ 3. 结语

Pimozide 主要通过选择性拮抗中枢多巴胺D2受体，阻断Gi/o介导的腺苷酸环化酶抑制，恢复cAMP/PKA信号通路，调节电压门控Ca2+通道及GIRK电流，并重塑β-arrestin/ERK信号分支，从而削弱多巴胺神经传递。此外，Pimozide 拮抗α1肾上腺素能受体与5-HT2受体，抑制Gq/PLCβ介导的信号级联，阻断Kv11.1/hERG钾通道并调节STAT依赖的转录活性。文献报道显示，Pimozide与替莫唑胺联合在胶质母细胞瘤中表现出协同抗肿瘤作用，直接抑制SARS-CoV-2及人诺如病毒复制，阻断CatSper通道抑制人类精子过度活化，并作为FDA批准药物用于治疗抽动秽语综合征。未来研究可聚焦Pimozide的多靶点机制，推动其在神经精神疾病、肿瘤、病毒感染及生殖健康等领域的精准治疗开发，同时优化药效与安全性。