路书领航，磁珠分选稳当当~

发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2026/5/15 11:10:07

做过细胞分选的科研人都懂，磁珠分选看似步骤简单，却总容易因为细节翻车：纯度不够、细胞回收率低、操作手忙脚乱……

路书领航员上线again,超详细磁珠分选实操指南，从试剂准备到流式验证，全程 step by step 拆解，稳稳拿下高纯度样本！

磁珠分选技术全流程

一、实验前准备-全套试剂耗材

磁珠分选-所用全套试剂耗材

二、磁珠分选步骤参考（以小鼠脾脏为例）

实验思路框架

▼

▲

样本来源

C57 Mouse

取材

Spleen

样本处理

通过研磨加裂红方式处理为单细胞悬液

分选目的细胞

l CD11B+Myloid髓系细胞

l F4/80 MacroPhage巨噬细胞

实验所用试剂耗材

▼

▲

产品分类

产品编号

名称

规格

Myloid髓系分选磁珠

S0K0007

CD11b NanoBeads, human and mouse（RUO）

1ml/2ml

巨噬细胞分选磁珠

S0K0012

Anti-F4/80 Nanobeads, mouse（RUO）

1ml/2ml

CD8分选试剂盒

S0K0005

CD8 Nanobeads, mouse（RUO）

1ml/2ml

分选器/磁铁

S0D3004

Starter MagSep Separator (8S)

盒

分选柱

S0D3012

S Separation Columns

25个/盒

分选架

S0D3005

MultiStand

个

分选Buffer

S0D3018

Starter MagSep Separation Buffer

250ml

组织消化解离

abs9482

Tissue Dissociation Solution

10T/25T/50T

筛网

abs7232

70um细胞筛网（200目，白色，底面过滤）

50个/箱

免疫细胞预富集

abs9102

percoll

100ml

10XPBS缓冲液

abs961

PBS缓冲液（10×）

500ml

1640培养基

abs9484

RPMI 1640培养基（含L-谷氨酰胺，不含HEPES）

500ml

红细胞裂解液（1×）

abs9101

RBC Lysis Buffer

100ml

阻断FCR非特异性染色

S0B0599

Mouse FcR Blocking Reagent

200T

染色缓冲液

abs9475

Flow cytometry staining buffer

500ml

流式鉴定

563168

BV711 Rat Anti-CD11b

50ug

流式鉴定

565411

BV421 Rat Anti-Mouse F4/80

50ug

流式鉴定

563068

BV510 Rat Anti-Mouse CD8a

50ug

流式鉴定

561037

APC-Cy™7 Rat Anti-Mouse CD45

100ug

路书领航，磁珠分选稳当当~

做过细胞分选的科研人都懂，磁珠分选看似步骤简单，却总容易因为细节翻车：纯度不够、细胞回收率低、操作手忙脚乱……

路书领航员上线again,超详细磁珠分选实操指南，从试剂准备到流式验证，全程 step by step 拆解，稳稳拿下高纯度样本！

磁珠分选技术全流程

一、实验前准备-全套试剂耗材

磁珠分选-所用全套试剂耗材

二、磁珠分选步骤参考（以小鼠脾脏为例）

实验思路框架

实验所用试剂耗材

1，分选Buffer预处理：关键步骤勿省略！

开启超声仪，对分选 Buffer 进行超声去气约10min

去气完成后，将Buffer预冷至 2~8℃，备用

2、细胞计数&活率测定

提前制备完成单细胞悬液

取10-20μL细胞悬液，与等体积的 台盼蓝染液（4%） 混合

取适量混合液（通常10μL）加入计数仪专用的一次性计数载玻片

将载玻片插入仪器，自动分析细胞总浓度（cells/mL）、活细胞浓度和活率百分比

3、分选柱润洗及磁性标记

准备分选柱：选择合适的分选柱（如MS、LS、LD柱），将其置于磁性分选器上。用3 mL 缓冲液润洗柱子。

细胞计数后，300×g 离心 10min，弃上清

每 1×10⁷细胞加 90 μL 缓冲液重悬每 1×10⁷细胞：90μL 缓冲液重悬 + 10μL 磁珠，2~8℃孵育 15min

4、磁性分离

上样：将标记后的细胞悬液加载到分选柱上（未标记细胞）。

洗涤与收集：根据实验需求分管收集

阴性分选（去除非目标细胞）：目标细胞未结合磁珠，会直接流穿分选柱。收集流穿液，即为富集的目标细胞。

阳性分选（直接获取目标细胞）：目标细胞结合磁珠并被吸附在柱内。

缓冲液洗涤柱子 3 次，每次 3 mL，待柱内液体完全流空后再加下一次。合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上。

向柱内加入 5 mL 缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞

5、流式验证：分选效果金标准

取适量细胞用荧光抗体染色，上流式细胞仪检测分选纯度，这是验证分选效果的金标准。

未分选前，小鼠CD11b

分选后，小鼠CD11b（S0K0007,用量20ul）

分选后，小鼠CD11b（S0K0007,用量10ul）

未分选前，小鼠F4/80

分选后，小鼠F4/80（S0K0012,用量10ul）

分选后，小鼠F4/80（S0K0012,用量5ul）

三、小优有妙计--新手避坑核心要点

1，磁珠分选实验前，分选Buffer超声去气有必要吗？

2，磁珠分选，什么时候选择阳性分选，什么时候选择阴性分选？

如果下游是功能研究，推荐优先使用阴性分选，以确保细胞功能不受分选过程的影响。

如果追求高纯度、速度快，且下游实验对细胞激活不敏感，阳性分选是更直接的选择。

对于非常稀有或复杂的细胞（如肿瘤浸润淋巴细胞），也可采用 “复合分选”策略：先阴性分选去除大量杂质（如B细胞、巨噬细胞等）进行“预富集”，再对富集后的细胞进行阳性分选，以获得超高纯度。

更多磁珠分选产品（部分List展示），欢迎选购~

取10-20μL细胞悬液，与等体积的台盼蓝染液（4%）混合