| 培养时间 | 操作步骤 | 细胞状态 | 第 1 天
1. 血细胞分离机 / Ficoll 分离外周血 PBMC;2. 贴壁法 / 磁珠法获得单核细胞;3. 加入 GM-CSF (500-1000U/ml) 和 IL-4 (500U/ml) 培养
单核细胞(Monocyte)
第 1-5 天
每 2-3 天半量换液一次,并补加 GM-CSF 和 IL-4
诱导为未成熟 DC(iDC)
第 5 天
(可选步骤)加入肿瘤抗原 (50μg/ml) 或抗原肽,进行抗原负载
未成熟 DC(iDC)
第 6 天
加入成熟刺激因子:TNF-α(10ng/ml)、IL-1β(10ng/ml)、IL-6 (1000U/ml)、PGE2 (1μg/ml)
诱导为成熟 DC(mDC)
第 7-8 天
继续培养,最终收获功能成熟的 DC 细胞
成熟 DC(mDC)