CY2-丙酮酸，CY2-Pyruvic acid

中文：CY2-丙酮酸

英文：CY2-Pyruvate

化学分子结构与属性
其分子结构由三部分构成：

CY2荧光发色团：负责吸收和发射荧光，通常具有苯并吲哚或类似结构，使其在近红外或可见光区（具体波长取决于CY2的确切结构，通常CY系列染料CY2、CY3、CY5等发射波长依次红移）有强吸收和发射。

连接臂：通常为烷基链，连接荧光团与反应基团，提供空间灵活性，减少标记对生物分子功能的干扰。

丙酮酸衍生的反应性末端：核心部分是高度亲电的活化酯（如NHS酯）。它能与生物分子（如蛋白质、抗体、多肽）表面的伯氨基（-NH2） 在温和的碱性条件下（pH 7.5-9.0）高效、特异性地形成稳定的酰胺键，从而将CY2荧光团共价连接到目标分子上。

物理化学特性

外观：通常为深红色或紫色固体（取决于CY2结构）。

溶解性：易溶于无水极性有机溶剂（如DMF、DMSO），在水溶液中不稳定，活性酯会水解，故需现配现用。

光谱特性：具有高的摩尔吸光系数和荧光量子产率，发射荧光强且稳定。光稳定性较好，但需避光保存。

反应性：NHS酯基团对水分和亲核试剂敏感，储存和使用需干燥环境。

功能应用
CY2-丙酮酸的核心功能是作为生物偶联试剂，广泛应用于：

生物成像与检测：标记抗体用于免疫荧光染色、Western Blot检测，标记核酸用于原位杂交，实现细胞或组织内靶分子的高灵敏度、多色可视化。

蛋白质组学研究：标记蛋白质，用于荧光双向差异凝胶电泳，或研究蛋白质-蛋白质相互作用。

流式细胞术：标记识别细胞表面抗原的抗体，实现细胞分型和定量分析。

生物传感器开发：作为信号报告基团，构建荧光生物传感器。

实验反应与领域扩展
在实验中，标记反应通常在磷酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液（pH 8.5左右）中进行，将CY2-丙酮酸（溶于无水DMSO）滴加至含靶蛋白的溶液中，室温避光反应1-2小时。随后通过凝胶过滤层析（如使用Sephadex G-25柱）或透析去除未反应的染料和小分子杂质，这是关键的纯化步骤，以确保标记产物的纯净度和实验特异性。