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发布人:上海雅吉生物科技有限公司
发布日期:2026/1/8 8:43:35
产品概述
自备仪器耗材
高速冷冻离心机、侧摆摇床、1.5 mL离心管、磁力架、超滤管(MWCO:10 kDa)使用方法
1. 样品预处理
1)去除细胞。4℃,300 g,离心5 min,转移上清到新的离心管;
注意:对无细胞的样品,可以跳过此步骤。
2)去除细胞及细胞碎片。4℃,2000g,离心10 min,转移上清到新的离心管;
3)去除大体积颗粒。步骤 2)得到的上清,4℃,14000 g,离心30 min,转移上清到新的离心管。
2. 富集外泌体
1)取100 μL Exosome Beads 到1.5 mL离心管,置于磁力架上1 min,吸弃磁珠保护液;
2)向上述磁珠中加入500 μL经预处理后的样品(如果不足500 μL,可用Solution A补足),离心管固定在侧摆摇床上,17 rpm,室温旋转孵育30 min;
注意:在某些样本中,磁珠在结合外泌体过程中,可能会结团,但不影响分离效果,请放心使用。
3)置于磁力架上,静置30 s,弃上清;
4)加入1 mL Solution A,上下颠倒混匀,置于磁力架上,静置30 s,弃上清;
5)重复上述步骤4)2次,保留磁珠。
3. 分离外泌体
1)向富集外泌体后的磁珠中加入100 μL Elution Buffer,涡旋振荡30 s;
2)将离心管固定在侧摆摇床上,17 rpm,室温旋转孵育30 min;
3)置于磁力架上,静置30 s,转移上清到新的1.5 mL离心管,该上清为外泌体。
注意:外泌体不能长时间保存在Elution Buffer中。若长时间保存,可使用超滤管(MWCO:10 kDa)将溶液置换为PBS。
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