FITC-甘露糖，Fitc-Mannose，制备重要反应条件

发布人：广州为华生物科技有限责任公司

发布日期:2026/1/5 16:20:33

FITC-甘露糖（英文名：FITC-Mannose；化学名称：Fluorescein isothiocyanate conjugated to D-Mannose）并非天然存在的分子，而是通过化学合成手段将荧光报告基团FITC与D-甘露糖定向偶联而成的功能化探针。其构建核心在于利用FITC分子末端的异硫氰酸酯基团（–N=C=S）与甘露糖分子中游离的伯氨基（通常需先对甘露糖进行氨基化修饰，例如通过还原胺化引入–NH₂）发生亲核加成反应，形成稳定的硫脲键（–NH–CS–NH–）。这一反应通常在无水碳酸氢钠缓冲液（pH 8.5–9.5）中进行，以促进氨基去质子化并提高反应效率，同时避免FITC水解。

制备过程中需严格控制反应条件：温度宜维持在4°C至室温之间以减少副反应；反应时间一般为2–6小时，过长可能导致FITC自聚或甘露糖降解；纯化步骤常采用凝胶过滤层析或反相高效液相色谱（RP-HPLC），以去除未反应的FITC（因其疏水性强，易干扰后续生物实验）。值得注意的是，并非所有市售“FITC-甘露糖”都具有相同偶联位点或取代度——部分产品可能通过甘露糖的C6位羟基经活化后间接连接FITC，此类结构虽不依赖氨基，但合成路径更复杂且可能影响糖的识别构象。因此，在选购或制备时需明确其化学结构、摩尔取代比及纯度（通常要求>95%）。高质量的FITC-甘露糖应呈现亮黄绿色粉末，溶于水或PBS后澄清透明，在避光、–20°C条件下可长期保存。该产品的成功构建依赖于对糖化学与荧光标记技术的精准把控，是化学生物学交叉领域中分子探针设计的典型范例。