[荧光探针]钙离子荧光探针FLUO-2 AM，Ca荧光探针，钙信号探针

一、定义属性：细胞钙动态的“实时追踪者”

FLUO-2 AM是一种高灵敏度、细胞膜通透性的钙离子荧光探针，属于Fluo系列染料的升级版本。其核心功能是通过荧光信号变化实时监测细胞内游离钙离子（Ca²⁺）浓度，激发波长约494 nm，发射波长约517 nm，可兼容FITC通道，适用于荧光显微镜、激光共聚焦显微镜及流式细胞术等设备。作为酯化前体，FLUO-2 AM需进入细胞后被酯酶水解为活性形式FLUO-2，才能与Ca²⁺结合并发出荧光，这一特性使其成为研究细胞钙信号转导的“理想工具”。

二、分子结构：酯化修饰与荧光核心的“精密嵌合”

FLUO-2 AM的分子结构由两部分构成：

1. 荧光核心：基于荧光素衍生物的共轭体系，含多个羟基和羧基，可与Ca²⁺形成稳定配位键，结合后荧光强度增强100倍；

2. 酯化修饰：通过乙酰氧甲基（AM）基团修饰羧基，中和分子负电荷，使其从极性分子转变为脂溶性中性分子，从而穿透细胞膜。进入细胞后，AM基团被酯酶水解，释放游离FLUO-2，恢复对Ca²⁺的敏感性。

三、反应原理：光信号与钙浓度的“动态耦合”

FLUO-2 AM的作用机制基于“荧光增强型”检测：

1. 静息状态：细胞内Ca²⁺浓度低时，FLUO-2荧光微弱；

2. 激活状态：当Ca²⁺浓度升高（如神经元放电、心肌细胞收缩），FLUO-2与Ca²⁺结合，分子内共轭结构改变，荧光强度显著增强；

3. 定量分析：通过荧光强度与Ca²⁺浓度的线性关系，可精确计算细胞内钙离子动态变化，时间分辨率达毫秒级。

四、应用领域：从基础研究到临床前探索的“全链条覆盖”

1. 神经科学研究：监测神经元放电过程中钙信号的快速变化，揭示突触传递机制；

2. 心血管研究：分析心肌细胞收缩-舒张周期中的钙瞬变，评估心律失常风险；

3. 肿瘤生物学：研究肿瘤细胞凋亡通路中钙信号的异常激活，为靶向治疗提供依据；

4. 药物筛选：通过高通量流式细胞术，筛选调节钙信号的潜在药物分子。

FLUO-2 AM以其高灵敏度、低毒性和兼容性，成为细胞钙信号研究的“金标准”探针，持续推动生命科学领域对钙依赖性生理过程的认知边界。