AF532 TSA，Alexa Fluor532 酪胺信号放大试剂

产品名称：AF532 TSA，Alexa Fluor532 酪胺信号放大试剂

Alexa Fluor532 酪胺信号放大试剂（AF532 TSA）是黄绿色荧光的高灵敏度信号放大工具，核心定位是 “低丰度生物分子检测的荧光信号放大试剂”，基于酪胺信号放大技术（Tyramide Signal Amplification, TSA），凭借酪胺的酶促聚合反应与 AF532 的荧光特性，实现检测信号的数十至数百倍放大，在低丰度抗原、核酸检测中不可或缺。其分子结构为酪胺分子（对羟基苯乙胺）的氨基或羟基位点共价偶联 AF532 荧光团，酪胺的酚羟基是酶促反应的关键位点 —— 在辣根过氧化物酶（HRP）催化下，酪胺可被过氧化氢（H₂O₂）氧化为高活性的酪胺自由基，自由基可快速与邻近的富电子分子（如蛋白的酪氨酸残基、组氨酸残基）发生共价结合，形成 AF532 标记的聚合物，从而实现信号放大（每个 HRP 分子可催化数百个酪胺分子结合，信号放大倍数通常为 50-500 倍）。

光学性能上，AF532 的激发 / 发射波长（532/554nm）适配黄绿色通道，与 HRP - 抗体检测体系兼容（HRP 无荧光，不干扰 AF532 信号）；量子产率约 0.8，荧光亮度高，即使少量标记也能产生清晰信号；抗光漂白能力强，适合高分辨率成像（如共聚焦、超高分辨显微镜）；黄绿色荧光在生物样本中的自发荧光较低，且与常用染料（如 DAPI、AF488、AF594）的光谱重叠小，适合多色成像。

技术原理与优势聚焦 “高灵敏度与特异性”：TSA 技术的核心是 “酶促放大 + 局部标记”——HRP 仅在结合靶分子的抗体附近催化酪胺聚合，AF532 标记集中在靶分子区域，避免非特异性扩散导致的背景升高，特异性远超传统信号放大方法（如 streptavidin-biotin 系统）；放大倍数可控，通过调整 AF532 TSA 浓度、HRP 孵育时间或 H₂O₂浓度，可根据靶分子丰度调整信号强度（低丰度分子用高放大倍数，高丰度分子用低放大倍数）；兼容多种样本类型，包括细胞爬片、组织切片、生物芯片、流式细胞术样本，且可用于固定细胞与组织（活细胞因 H₂O₂毒性不适用）。

应用场景覆盖低丰度分子检测：在免疫组织化学中，检测肿瘤组织中的低丰度肿瘤标志物（如 HER2、EGFR 的低表达）、神经组织中的微量神经递质受体（如 GPCR），AF532 TSA 的放大信号可清晰显示靶分子的定位，辅助病理诊断；在免疫荧光成像中，观察细胞内低丰度信号通路蛋白（如磷酸化蛋白、转录因子）的表达与核转位，高灵敏度可检测药物处理后的微弱表达变化；在原位杂交（FISH）中，检测低拷贝数的核酸序列（如病毒基因组、基因突变位点），AF532 TSA 标记可增强杂交信号，实现单拷贝或低拷贝序列的可视化；在生物芯片检测中，提升蛋白芯片、基因芯片的检测灵敏度，实现微量分析物（如 pg 级蛋白、fmol 级核酸）的检测，拓展芯片的检测范围；在流式细胞术中，标记细胞表面低丰度受体（如干细胞表面抗原、免疫细胞活化标志物），放大荧光信号，提升检测信噪比，实现低丰度细胞亚群的识别与分选。

储存与使用需注意：AF532 对光敏感，酪胺易氧化，需 - 20℃避光、密封、干燥保存，避免反复冻融（建议分装为单次使用体积）；使用前需用专用 TSA 稀释液（含封闭剂，避免非特异性结合）稀释，AF532 TSA 工作浓度通常为 1:50-1:200（根据放大需求调整）；实验流程需严格遵循 “封闭→一抗孵育→HRP 标记二抗孵育→AF532 TSA 孵育（加 H₂O₂）→洗涤” 步骤，HRP 孵育后需充分洗涤（3 次以上），避免游离 HRP 导致非特异性放大；H₂O₂浓度需严格控制（通常 0.001%-0.01%），过高会导致细胞 / 组织损伤或酪胺过度聚合，过低则放大效率不足；孵育温度控制在室温（20-25℃），避免高温（>30℃）导致酶失活；多色实验需先进行 TSA 标记，再进行其他荧光染料标记，避免 HRP 氧化其他荧光团。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年9月28日