科研人员发展新式蛋白质互作显像技术

近期，将来技术学院生物医学工程系陈匡时教授课题组根据双分子荧光互补（BimolecularFluorescenceComplementation，BiFC）技术，发展了一种还可以在纳米限度下科学研究体细胞内蛋白相互作用的新型显像技术。该技术克服了传统式BiFC技术易造成假阳性数据信号的难题，并被用来在纳米限度下分析宿主细胞关键蛋白参加HIV-1病毒组装的工作模式。该科研成果已发布于学术刊物ACSNano，题型为“ABackgroundAssessableandCorrectableBimolecularFluorescenceComplementationSystemforNanoscopicSingle-MoleculeImagingofIntracellularProtein-ProteinInteractions”。

BiFC技术是一种可在人体细胞内显像蛋白相互作用的方式 ，其基本原理是将一个完全的荧光蛋白切分成2个非荧光精彩片段，再将这两个非荧光精彩片段各自与将会产生相互作用的2个总体目标蛋白联接产生融合蛋白，当总体目标蛋白在人体细胞内相互作用时，这两个非荧光精彩片段会因为室内空间间距的挨近产生完善的荧光蛋白。殊不知，在总体目标蛋白不产生相互作用的情形下，2个非荧光精彩片段也有可能因为任意碰撞而自组装成完全的荧光蛋白，造成假阳性数据信号，这限定了BiFC技术对总体目标蛋白相互作用的定量分析法。为了更好地克服这一难题，陈匡时课题组研发了一种可以检验并解决这类由非荧光精彩片段自组装造成的假阳性数据信号的方式 ，并将其取名为BAC-BiFC（BackgroundAssessableandCorrectable-BimolecularFluorescenceComplementation）（图1）。从总体上，她们给BiFC中的一个总体目标蛋白联接上一个参照荧光蛋白，该参照荧光蛋白不但可以用来表现总体目标蛋白在人体细胞内的体现程度与空间布局，还促使研究者能够根据比例显像分辨不一样基因表达水准下假阳性数据信号的高低，进而得到 不会受到假阳性信号干扰的试验标准。

“根据发展新的超分辨BiFC技术，大家发觉宿主细胞AGO2蛋白参加了HIV-1病毒颗粒组装的整个过程，是病毒增殖不可或缺的原件。这一发觉有希望为HIV病毒和别的逆转录病毒的分析给予新的角度。”陈匡时表明。

在HIV-1病毒的增殖全过程中，其结构蛋白Gag需要与众多宿主细胞蛋白产生相互作用以进行病毒颗粒的组装与发芽。研究者运用BAC-BiFC技术，在纳米限度下对Gag蛋白与宿主细胞蛋白AGO2中间的相互作用开展了科学研究【根据融合超分辨率显微镜技术directstochasticopticalreconstructionmicroscopy（dSTORM）完成】。与先前的分析結果不一样，研究者发觉Gag蛋白并不是只受体病毒颗粒包裝固定不动数量的AGO2，只是在病毒组装后期招募了大量的AGO2（图2），这提醒AGO2参加了HIV-1病毒颗粒组装的整个过程，是病毒增殖不可或缺的原件。这一发觉有希望为HIV-1病毒和别的逆转录病毒的分析给予新的角度。值得一提的是，除开本工作所涉及到的研究对象外，BAC-BiFC技术也具备对生命历程中其它各类蛋白相互作用甚至其它生物分子中间的相互作用开展可视化科学研究的发展潜力。 

 写到最后：

我们提供：多肽合成、定制多肽、多肽中间体、化妆品多肽、目录肽、多肽文库构建、抗体服务、氨基酸及衍生物、订书肽、药物肽、固相树脂及缩合试剂等。 如需要请选择杭州固拓生物公司。