重组蛋白药物宿主蛋白残留：测定技术与表征方法深度剖析

发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2025/2/11 14:46:05

01 重组蛋白药物

重组蛋白药物作为借助基因工程技术精心打造的一类药物，其制备流程遵循特定路径。具体而言，是把目标基因巧妙植入表达系统，此表达系统一般为细胞或微生物。植入的基因如同精密指令，编码目标蛋白的氨基酸序列，促使宿主细胞凭借自身固有机制开展目标蛋白的合成工作。后续历经一系列严谨步骤，涵盖培养环节使宿主细胞大量增殖并合成蛋白，收获阶段收集含有目标蛋白的产物，纯化过程去除杂质以提升蛋白纯度，以及其他精细处理操作，最终成功获取纯化的重组蛋白药物制剂。

重组蛋白药物具备诸多显著优势，高纯度使其有效成分更为纯粹，能精准发挥作用；高特异性让其可精准靶向作用位点，减少不必要的副作用；低免疫原性降低了人体免疫系统对其产生不良反应的概率。在医疗领域，重组蛋白药物已实现广泛应用，在神经保护方面能够维护神经细胞功能，在肿瘤治疗领域可通过多种机制抗击肿瘤，于免疫调节中有效平衡机体免疫状态等。诸如生长因子可促进细胞生长与修复，单克隆抗体能特异性识别并结合靶标发挥治疗功效等常见重组蛋白药物，在临床治疗进程中占据极为关键的地位，为众多患者点亮了康复希望之光，极大地改善了他们的健康状况与生活质量。

02 宿主细胞蛋白

在生物制药领域，尤其是重组蛋白药物与单克隆抗体的生产进程中，宿主细胞蛋白（HCP）作为一种杂质相伴而生。当 HCP 的含量超出特定阈值时，就极有可能在人体中诱发免疫反应或者其他不良状况。故而，于蛋白质生物制剂的生产流程里，对 HCP 含量的精确检测以及全面评估，已然成为生物制品质量把控方面极为关键的一项指标。

HCP 属于一种具有高度异质性的蛋白污染物，是生物制品生产中难以彻底消除的杂质类型。其来源途径多样，既可能在重组发酵的环节中自然产生，也可能因外源物质的介入而被引入。即便历经多次繁复且精细的分离纯化操作，HCP 依然存在与产品一同被纯化或者伴随产品而分离的可能性。鉴于此，针对原料药以及下游纯化过程（DSP）中间体里的 HCP，展开深入的表征分析与精准的量化测定就显得尤为必要且刻不容缓。

03 检测方法和原理

在生物制药过程中，为精准监测宿主细胞蛋白的残留状况，多种先进的分析技术得以运用。酶联免疫吸附测定（ELISA）凭借其特异性与敏感性，能够高效地捕捉并量化残留的宿主细胞蛋白；质谱分析（Mass Spectrometry）则以其高分辨率和精准的质量测定能力，对 HCP 进行细致的鉴定与分析；基于免疫学方法的定量检测也发挥着重要作用，它们协同作战，为生物制药企业把控产品质量、保障安全性与有效性筑牢了坚实的技术防线。

在众多检测手段中，ELISA 技术在 HCP 的测定与监测方面应用尤为广泛，其中双抗体夹心 ELISA 方法更是常用之选。该方法在检测生物制药的 HCP 残留时，有着明确的衡量标准范围，并且需要依据不同的细胞株类型来选用与之匹配的检测试剂盒，如此才能确保检测结果的准确性与可靠性，为生物制药的质量控制提供有力的数据支撑与技术保障。

04 相关法律法规要求

宿主细胞蛋白（HCP）作为生物制品里的杂质蛋白，因其可能给人体带来不良影响，故而处于监管机构的严密审视之下，并有着严格的法规约束。

就国际层面而言，国际人用药品注册技术协调会（ICH）的指南 Q6B 明确规定，需凭借依照 ICH 准则构建的既敏感又经验证的有效手段，对残留的 HCP 予以监控，且其残留量常规需控制在小于 100ppm 的水平。

从国内来看，2020 年版中国药典三部各论清晰表明，HCP 的标准是占总蛋白含量应小于 0.05%。

在大洋彼岸的美国，FDA 法规提出要用一种高灵敏度的检测方法来测定药品中的 HCP，其含量必须低于检测限，一般情况下要小于 100ppm。

而欧洲药典也有相关限定，在生物制品领域，HCP 的含量应当维持在小于 0.1% 的范围之内。

05 HCP相关研究

在 HCP 检测的范畴内，所涉及的抗原呈现出高度复杂的混合特性，其涵盖的抗原数量多达约 2000 种。这一特性使得 HCP 检测所采用的方法与临床及科研常用的 ELISA 方法存在显著差异，它要求更为复杂且精准的检测流程与技术手段。相关研究明确指出，检测过程中所运用的抗体对 HCP 抗原的覆盖范围及程度，会对最终检测结果与实际 HCP 含量的契合度产生直接且关键的影响。

有学者在深入探究中察觉，生产单抗制品的工艺差异会致使中间产物的 HCP 种类出现明显不同。不仅如此，另有实验数据有力地证实，当研究人员选用不同株的空 CHO 细胞，或者针对同一细胞株运用不同工艺开展重组制品生产时，所产生的 HCP 其成分构成以及各成分的含量均展现出较大的波动性与差异性。

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名称

货号

规格

胶原酶I型残留检测试剂盒

abs590012-96T

96T

BSA残留检测试剂盒

abs590008-96T

96T