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发布人:上海创赛科技有限公司
发布日期:2024/11/19 17:31:03
产品名称:鼠尾胶原蛋白I型,无菌溶液,溶解于0.006mol/L HAc英文名称:Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail品牌:PERFEMIKER纯度:5mg/ml详细描述:
鼠尾胶原蛋白I型 Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail 产品别名:I型鼠尾胶原蛋白,Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail 产品型号:C20-200110 产品包装:10mg/2ml 产品品牌:Perfemiker,大量现货,上海秒发
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产品别名:Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail
产品型号:C20-200110
产品包装:10mg/2ml
产品品牌:Perfemiker 产品描述:溶解于 0.006mol/L HAc,无菌溶液。 运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期1年。不可冻存。 产品介绍: 胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏器官外基质的主要成分,但在皮肤、肌腱、骨骼中分布*为广泛。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型,I型胶原蛋白(Collagen, Type I)结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体,在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构,被广泛用于多种细胞的培养基质,如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外,I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织形态的发生等方面也具有重要应用。 博飞美科的鼠尾胶原蛋白I型 (rat tailtendon collagen type I) 是通过Birkedal-Hansen 的方法,通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿 ,培养一些在普通细胞、培养器皿中不易贴壁的细胞。 也可用于制备三维胶 ,模拟真实的生长环境 ,使细胞在三维环境中生长 。 Perfemiker鼠尾胶原蛋白包被的
培养皿中生长的 PC-12 细胞 Perfemiker鼠尾胶原蛋白三维胶中
生长的 NIH-3T3 细胞(接种后 5天) 和Sigma鼠尾胶原蛋白(cat# C7661)
SDS-PAGE 电泳对比。
A: Sigma B:Perfemiker 使用方法1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度: 1-5ug/cm2 以包被浓度为 2 ug/cm2 为例: 用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。按表 (一)体积加到相应的培养器皿中:
表面积(cm2 ,每孔或每皿)
加入 0.012mg/ml 胶原的体积 ( ul )
96孔细胞培养板
0.3
50
24孔细胞培养板
1.9
300
12孔细胞培养板
3.8
600
6孔细胞培养板
9.5
1580
35mm细胞培养皿
8
1330
60mm细胞培养皿
21
3500
100mm细胞培养皿
55
9170
确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面,开盖在超净台上过夜晾干。 也可以在室温放置 1小时后,用PBS洗3-4次后直接使用。 包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。 2、三维胶原的制备 Perfemiker鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。生友胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06X 体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。 需要的溶液 ( 均需要 无菌 、 预冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示 )或 10x 培养液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 双蒸水 A.不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul shengyou鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul 10xPBS或10x培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10xPBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。 B.含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200ul Perfemiker鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul 10xPBS或10x培养液,混匀(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。 使用注意事项: 鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶 ,在操作过程中要尽量保持低温 。
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