爱必信(上海)生物科技有限公司
首页 产品目录 产品目录(简版) 公司动态 企业认证 公司相册 联系我们

多重免疫组化VS免疫荧光

发布人:爱必信(上海)生物科技有限公司

发布日期:2020/12/15 13:40:14

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique,IF )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。


多重免疫组化(mIHC):主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点),产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合,这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积,与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合,经几次这样的循环放大,可以结合大量的酶分子or荧光基团,结果使其检测信号得到几何级放大。


mIHC和IP的区别:

 
多重免疫组化(mIHC)
免疫荧光(IP)
靶点数量
可同时染色7色(含dapi)
一般标记三种(含dapi)大于三种效果差
一抗种类
同一种属的不同抗体即可满足要求
不同种属的不同抗体
二抗 种类
不同种属的不同抗体
连接荧光探针的不同种属二抗
染色策略
分步染色,多次重复进行免疫组化操作
样本抗原的空间位置的差异,需要设计复杂的染色策略。样本/靶点的差异导致染色策略的差异,染色过程复杂、多变  
染色效果
高染色分辨率和染色特异性,信号强度更强,更稳定,淬灭时间更长,无背景影响,各靶点的信噪比大大提高,尤其适合组织基于单细胞的定量分析
亮度较弱,容易淬灭,各种抗体间存在互相影响,背景较高,对基于单细胞的定量分析不利。
实验成本
1同一种属的一抗和二抗,价格相对便宜。
2简单的染色策略和无需任何重复的预实验,即可掌握整个染色技术,大大缩小了预实验的材料损耗。
3一抗和二抗工作浓度更低,单次费用更低
1不同种属的抗体价格存在差异,一般种属稀少的价格高。
2不同种属的二抗,价格存在差异,一般稀少的种属价格高。
3寻找合适的染色策略,复杂的多次重复的预实验大大的增加了实验成本
应用范围
二抗具备通用性,因此实验室中所有的研究领域均可使用
二抗不具备通用性,实验室中应用领域受到局限
 

相关产品和服务推荐:

多重荧光免疫组化染色试剂盒

多重荧光免疫组化服务
 

货号
产品名称
四色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
五色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
六色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
七色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
四色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
五色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
六色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
七色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
 

Absin特色产品线(全部现货):
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

相关新闻资讯

初次使用新血清的核心步骤与关键点

2026/04/17

第一步:使用前的准备与测试这是决定成败的关键,切忌直接用于珍贵细胞。1. 验收与检查:收到血清后,立即检查内外包装有无破损、渗漏。血清应为冰冻或冰水混合状态,若已完全融化,需联系供应商。2. 正确解冻与分装:方法:将血清从-20℃移至4℃冰箱过夜溶解,再在室温下放置约30分钟使其完全融化。全程需轻柔摇晃瓶身,使温度与成分均匀。禁忌:严禁将冻存血清直接放入37℃水浴快速解冻,这极易导致大量蛋白沉淀析

科研人狂喜!这款「无毒多面手」CTB,撑起神经元示踪 / 免疫佐剂 / 脂筏标记半壁江山?

2026/04/17

做神经科学、免疫学或细胞生物学研究的朋友,是不是常遇到这些糟心事儿:神经元示踪剂毒性太高,实验动物存活率拉胯,阳性信号还模糊?免疫佐剂要么效果弱,要么刺激性强,口服给药更是难上加难?脂筏标记总被非特异性结合干扰,透化处理还容易破坏膜结构?直到我挖到「霍乱毒素 B 亚单位(CTB)」这款科研神器 重组无毒性设计 + GM1 高特异性结合,直接把三大核心应用场景的痛点一锅端,还被多篇顶刊认证,科研党

体内巨噬细胞清除实验解决方案

2026/04/17

体内巨噬细胞清除实验的核心是特异性去除巨噬细胞群体,同时最大程度减少对其他免疫细胞和组织的影响,氯膦酸二钠脂质体(Clodronate Liposomes)清除法是目前特异性最高、应用最广泛的体内巨噬细胞清除方法,几乎不影响中性粒细胞、淋巴细胞等其他细胞。一、核心原理氯膦酸二钠本身难以穿透细胞膜,被包裹进脂质体后,可通过巨噬细胞的吞噬作用被摄入胞内;脂质体在巨噬细胞溶酶体中被降解,释放出氯膦酸二钠