ELISA/Western Blot/临床诊断——汇百益酶底物全场景解决方案

在酶联免疫吸附测定（ELISA）、Western Blot、组织化学染色及临床生化诊断中，酶底物是决定检测灵敏度与准确性的核心要素。它们如同检测体系的“信号转换器”——通过酶催化反应将微量目标物转化为可读取的比色、化学发光或荧光信号，直接影响诊断结果的可靠性。

湖南汇百益新材料有限公司「汇百试剂」品牌，推出酶底物系列产品，涵盖显色底物、化学发光底物与荧光底物三大品类，为体外诊断试剂开发、生命科学研究和临床检验提供高质量的原料保障。

酶底物的分类与选择

酶底物根据信号输出方式分为三类，各有特点：

• 显色底物（比色法）： 酶催化后产生颜色变化，用分光光度计读取吸光度。操作简便、成本低、肉眼可判，是ELISA和临床生化检测的主流选择。
  

• 化学发光底物： 酶催化后产生光信号，用发光检测仪读取。灵敏度最高（可达fg级）、背景极低，适合低丰度靶标检测。
  

• 荧光底物： 酶催化后产生荧光，用荧光酶标仪读取。灵敏度和易用性介于两者之间，适合高通量分析。
  

产品家族一览

一、HRP（辣根过氧化物酶）显色底物与化学发光底物

HRP是ELISA和Western Blot中最常用的标记酶，其底物包括显色底物和化学发光底物两大类。

1）ABTS（CAS：30931-67-0）
水溶性HRP底物，ELISA常用，背景低，可用SDS终止，检测波长为405nm。

2）TMB（CAS：54827-17-7）
目前ELISA中应用最广泛的HRP显色底物，氧化后呈蓝色（652nm），酸终止后变黄色（450nm），超过90%的ELISA实验使用TMB系统，稳定性好、使用安全。

3）TMB-HCl（CAS：64285-73-0）

TMB的盐酸盐形式，水溶性更佳。

4）TMB-PS（CAS：102062-36-2）磺化TMB衍生物，水溶性显著提升。

5）TMB二盐酸盐水合物（CAS：207738-08-7），TMB二盐酸盐水合物，适用于特定溶解需求。

6）4-CN（4-氯-1-萘酚，CAS：604-44-4）
HRP底物，反应产物为蓝色沉淀，适用于Western Blot等膜上检测。

7）鲁米诺（CAS：521-31-3）
HRP化学发光底物，在增强剂作用下可将光信号强度提升10-100倍，发光时间延长至30-60分钟，灵敏度可达飞克级，用于超灵敏ELISA和Western Blot。

8）异鲁米诺（CAS：3682-14-2）
鲁米诺异构体，化学发光性质相似，适用于特定标记应用。

二、磷酸酶底物

碱性磷酸酶（AP）是ELISA的另一主流标记酶，其底物包括比色底物PNPP、荧光底物4-MUP以及组织化学底物1-萘基磷酸酯系列。

9）PNPP（4-硝基苯磷酸盐 二钠盐 六水合物，CAS：333338-18-4）
碱性磷酸酶检测的“金标准”底物，经过数十年应用验证，反应产物为可溶性黄色产物，检测波长为405nm，可被NaOH终止，适合终点法测定。

10）PNPP（对硝基苯磷酸钠六水合物，CAS：4264-83-9）
PNPP的经典无水物形式。

11）PNPP（4-硝基苯磷酸盐 双环己铵盐，CAS：52483-84-8）
双环己铵盐形式，适用于特定溶解需求。

12）PNPP（4-硝基苯基磷酸双[三(羟甲基)甲胺]盐水合物，CAS：68189-42-4），磷酸酶培养基专用底物。

13）4-MUP（4-甲基伞形酮酰磷酸酯，CAS：3368-04-5）
磷酸酶荧光底物，灵敏度优于比色法，适合高通量检测。

14）1-萘基磷酸酯（CAS：1136-89-6）
组织化学底物，与重氮盐偶联生成不溶性有色沉淀，适合组织切片和凝胶电泳检测。

15）1-萘基磷酸酯 二钠盐（CAS：2183-17-7）
组织化学底物，二钠盐形式，水溶性优异（50mg/mL），适合水相反应体系。

16）1-萘磷酸单钠一水合物（CAS：81012-89-7）
前列腺酸性磷酸酶（PAP）测定的首选底物，游离1-萘酚<0.01%，背景低、特异性强，在前列腺癌的临床诊断中具有重要价值。

17）1-萘磷酸二钠 水合物（CAS：207569-06-0）
二钠盐水合物形式。

三、β-半乳糖苷酶底物

β-半乳糖苷酶是lacZ报告基因系统的核心酶，其底物包括比色底物ONPG、PNPG、X-Gal以及荧光底物MU-Gal。

18）ONPG（邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷，CAS：369-07-3）
β-半乳糖苷酶经典比色底物，检测波长为420nm，用于乳糖操纵子研究和酶活测定。

19）PNPG（4-硝基苯-D-吡喃半乳苷糖，CAS：3150-24-1）
β-半乳糖苷酶比色底物，检测波长为405nm，是大多数酶标仪的标准配置，在临床诊断中的应用比ONPG更广。

20）X-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷，CAS：7240-90-6）
产生蓝色不溶性沉淀，用于蓝白斑筛选（β-半乳糖苷酶活性筛选）。

21）2-苯乙基 β-D-半乳糖苷（CAS：63407-54-5）
β-半乳糖苷酶底物，适用于特定筛选应用。

22）MU-Gal（4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃糖苷，CAS：6160-78-7）
β-半乳糖苷酶荧光底物，高灵敏度检测。

四、β-葡萄糖苷酸酶（GUS）底物

X-Gluc系列是GUS染色的经典底物，产生蓝色不溶性沉淀，用于转基因植物GUS报告基因检测。

23）X-Gluc（环己胺盐，CAS：114162-64-0）
GUS染色经典底物，产生蓝色沉淀，用于转基因植物GUS报告基因检测。

24）X-Gluc（钠盐，CAS：129541-41-9）
GUS染色底物钠盐形式。

25）X-Gluc（β-D-葡萄糖苷酸钠盐，CAS：18656-96-7）
GUS染色底物，适用于特定溶解需求。

26）X-Gluc（5-溴-6-氯-3-吲哚基-D-葡糖苷酸环己胺盐，CAS：144110-43-0）
GUS染色底物衍生物。

五、Trinder反应试剂

Trinder反应试剂是一类高水溶性苯胺衍生物显色底物，在过氧化物酶催化下与4-氨基安替比林偶联产生有色染料，广泛用于临床生化检测中的尿酸、肌酐、血糖、胆固醇等指标测定。

27）TOPS（N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐，CAS：40567-80-4）
最大吸收波长550nm，用于尿酸、血肌酐等肾功能诊断试剂盒。

28）TOOS（N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐，CAS：82692-93-1）
最大吸收波长555nm，用于血糖、糖化蛋白、胆固醇等代谢指标检测。

29）MAOS（N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐一水合物，CAS：82692-97-5）
最大吸收波长630nm，高灵敏度Trinder试剂，适用pH范围5.5-9.5。

六、其他检测原料

30）D-荧光素钾盐（CAS：115144-35-9）
荧光素酶底物，生物发光检测，用于ATP检测、细胞活力测定和荧光素酶报告基因分析。

31）G-6-P-Na₂（葡萄糖-6-磷酸二钠盐，CAS：3671-99-6）
G-6-PD酶活性测定底物，用于红细胞酶缺陷诊断（如G6PD缺乏症筛查）。

32）CNP-AFU（2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷，CAS：157843-41-9）
岩藻糖苷酶（AFU）比色底物，用于肝癌等肝脏疾病的辅助诊断。

应用场景一览

ELISA（比色法）： TMB、ABTS、PNPP

ELISA / Western Blot（化学发光法）： 鲁米诺、异鲁米诺

ELISA（荧光法）： 4-MUP、MU-Gal

Western Blot / 免疫组化： 4-CN、TMB（沉淀型）、X-Gal

临床生化诊断（血糖、尿酸、肌酐等）： TOPS、TOOS、MAOS

基因报告系统： X-Gal（β-gal蓝白斑筛选）、X-Gluc（GUS染色）

前列腺癌诊断（PAP检测）： 1-萘磷酸单钠一水合物

肝脏疾病诊断（AFU检测）： CNP-AFU

荧光素酶报告基因 / ATP检测： D-荧光素钾盐

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