His-tag蛋白分离磁珠，用单分散聚苯乙烯微球或二氧化硅内核，瑞禧试剂

核心分离机理

His-tag蛋白分离磁珠采用固定化金属离子亲和层析原理，通过磁珠表面螯合的镍离子与重组蛋白组氨酸标签之间的配位作用实现目标蛋白捕获。这种固相分离模式突破了传统层析柱的流速限制，可在复杂生物样品中完成快速富集。磁珠的超顺磁特性使其在外加磁场作用下数秒内即可完成固液分离，显著缩短实验周期。

产地：西安瑞禧生物科技

纯度：≥99%

包装形式：小瓶密封

提示：仅供科研使用，不得用于人体实验

材料结构特征

磁珠基质通常选用单分散聚苯乙烯微球或二氧化硅内核，粒径分布于1-5微米区间，确保足够的比表面积与磁响应效率。表面修饰层通过多齿配体（如次氮基三乙酸或其衍生物）固定二价金属离子，形成稳定的三维配位环境。金属离子类型可根据靶蛋白特性灵活切换，镍离子适用于常规纯化，钴离子则提供更高选择性。

操作流程要点

标准实验流程包含平衡、结合、洗涤与洗脱四个阶段。样品需经适当裂解缓冲液处理，维持pH在7.5-8.0范围以保障配位稳定性。洗涤阶段采用梯度咪唑浓度（20-40 mM）去除非特异性吸附杂质，最终通过250-500 mM咪唑溶液竞争性洗脱目标蛋白。全程可在离心管或96孔板中完成，无需专用层析设备。

关键性能指标

1. 磁珠载量：通常≥40 mg His-tag蛋白/ml磁珠悬液

2. 磁响应时间：≤30秒（永磁铁分离）

3. 适用pH范围：6.0-9.0（工作pH 7.0-8.0）

4. 再生次数：5-10次（酸洗脱条件下）

5. 储存稳定性：4℃保存12个月活性保持率＞90%

典型应用场景

该技术广泛应用于大肠杆菌、酵母及哺乳动物细胞表达系统的重组蛋白纯化。对于膜蛋白、包涵体复性产物等难处理样品，磁珠法可有效减少样品体积并降低蛋白降解风险。在蛋白互作研究、酶学特性分析及抗体制备等下游工作中，高纯度洗脱产物可直接用于后续实验。

使用注意事项

金属离子泄漏是影响回收率的主要因素，建议定期监测洗脱液中镍离子浓度。含EDTA或还原剂的样品需预处理，避免螯合效应导致配体失活。对于低表达量蛋白，可适当延长结合时间或采用多次吸附策略。磁珠重复使用时应严格遵循再生规程，防止交叉污染。

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