ELISA 试剂盒适用抗凝剂的种类及使用禁忌

在ELISA实验中，抗凝剂用于防止血液样本在采集后凝固。使用抗凝剂的目的是为了获得血浆样本，而不是血清。抗凝剂的选择应根据ELISA试剂盒的具体要求和实验目的来确定，因为不同的抗凝剂可能对某些检测指标有特定的影响。在处理ELISA样本时，必须遵循正确的抗凝剂使用指南，以确保实验结果的准确性和可靠性。

ELISA试剂盒适用的抗凝剂选择需根据样本类型和检测目标综合评估，以下是关键推荐及注意事项：

一、抗凝剂选择优先级

1、‌常规检测‌：EDTA（性价比高）。

2、‌免疫检测‌：肝素（干扰最小）。

3、‌凝血检测‌：柠檬酸盐（特异性强）。‌

二、常用抗凝剂种类

1、EDTA（乙二胺四乙酸）

适用于大多数血浆样本（如细胞因子检测），可有效螯合钙离子防止凝血。‌

需注意：可能干扰部分检测（如梅毒抗体检测），建议通过预实验验证。‌

2、‌柠檬酸盐（枸橼酸钠）‌

推荐用于凝血功能相关检测（如凝血因子ELISA）。‌

需注意：可能轻微影响HBsAg等抗原检测，需通过回收率测试验证。‌

3、‌肝素（Heparin）‌

适用于需快速分离的血浆样本（如凝血相关因子检测）。‌

优势：对ELISA检测干扰较小，尤其适合梅毒螺旋体抗体等免疫检测。

三、抗凝剂使用注意事项

1、样本采集与处理

全血采集后需立即低温离心（3000转/10分钟）分离血浆，避免凝血因子激活。

若样本需长期保存，应按一次用量分装后冻存于-20℃，严禁反复冻融。

2、抗凝剂浓度控制

需严格按照试剂盒说明书推荐比例添加抗凝剂，过量可能导致蛋白变性影响检测结果。

3、特殊样本处理

对于含酶活性较高的样本（如血浆），可添加酶抑制剂（如抑肽酶）或进行酸化处理（1mol/L HCl）以抑制降解。

4、干扰控制

EDTA可能引起假阳性（如HIV抗体检测），需通过TPPA等确认实验排除‌。

溶血样本需弃用（血红蛋白干扰HRP显色系统）‌。

5、样本储存

处理后的样本应避免反复冻融，以免影响蛋白质的稳定性。

6、试剂盒兼容性

选择抗凝剂时，应考虑ELISA试剂盒的说明书要求，确保所选抗凝剂不会干扰检测结果。

此外，对于特定的ELISA试剂盒，可能还需要根据说明书的具体要求来选择合适的抗凝剂，以确保实验结果的准确性和可重复性。‌