外泌体绿色荧光标记染料PKH67

外泌体绿色荧光标记染料PKH67是一种用于标记外泌体膜的荧光染料，以下是关于它的详细介绍：

一、基本信息

• CAS号：存在多个说法，如125766-21-8、257277-27-3等。

• 外观：黄色至橙色固体或绿色粉末。

• 激发/发射波长：490/502 nm（绿色荧光），与标准荧光素滤片兼容。

• 溶解性：溶于大部分有机溶剂和水。

• 储存条件：

• 短期保存：4℃避光保存，稳定期6-12个月。

• 长期保存：-20℃避光干燥保存，避免频繁解冻。

• 运输条件：冰袋运输，确保低温环境。

二、功能特性

1. 高灵敏度：能够对外泌体进行高效标记，呈现出强而稳定的绿色荧光，便于在实验中进行检测和观察。

2. 低背景噪音：具有较低的荧光背景，减少了非特异性信号的干扰，使实验结果更加准确可靠。

3. 良好的细胞膜穿透性：脂溶性高，能够轻易穿透外泌体膜，与膜结构的脂质分子结合，实现对外泌体的标记。

4. 对细胞毒性小：在标记过程中，PKH67对细胞的毒性较小，能够维持细胞的活力，适合用于细胞相关的实验研究。

5. 荧光半衰期长：体内荧光半衰期为10-12天，适合长期观察细胞动态。

三、应用领域

1. 外泌体示踪：可用于追踪外泌体在体外和体内的分布、迁移和摄取等过程，研究外泌体在细胞间通讯、疾病诊断和治疗等方面的作用。

2. 细胞标记：用于标记细胞，观察细胞的增殖、分化、凋亡等过程，以及研究细胞间的相互作用和信号传导。

3. 药物研发：可作为药物载体的标记物，用于研究药物的靶向递送和释放等过程，评估药物的疗效和安全性。

四、使用方法

1. 染料工作液制备：用相应的稀释液将PKH67储存液稀释至合适的浓度（如100 μM），现配现用，避光操作。

2. 外泌体染色：

• 在外泌体中加入染料工作液，建议染料终浓度为2-5 μM。

• 混匀后孵育一定时间（如10分钟）。

• 通过离心或超滤等方法去除未结合的染料，得到标记后的外泌体。

3. 注意事项：

• 染料工作液应现配现用，不能提前配制，否则将影响染色效果。

• 标记后的外泌体在进行后续实验时，需要考虑荧光信号的衰减和背景干扰等问题。

• 过度染色会导致外泌体膜完整性丧失，最佳PKH67染料/外泌体用量需根据自身实验而决定。

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