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鲎试剂三肽/Endotoxin Substrate的工作原理及制备

发布人:杭州固拓生物科技有限公司

发布日期:2025/11/3 15:08:00

鲎试剂三肽是从鲎血细胞裂解物中提取或人工合成的具有特定序列的三肽物质。鲎试剂三肽是一种用于定量分析(例如细菌内毒素试验)的显色底物,用于检测和测量革兰氏阴性菌的组成成分——内毒素。当受到内毒素激活的酶的作用时,会释放出有色化合物(如对硝基苯胺),从而可以测量颜色强度并将其与内毒素的含量相关联。

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工作原理

内毒素激活:在内毒素存在的情况下,鲎血中的变形细胞会释放酶,从而激活凝血级联反应。
酶的作用:活化的酶(通常是凝血酶)随后作用于显色底物。
显色反应:酶裂解底物,释放出一种称为对硝基苯胺(pNA )的黄色化合物。
定量分析:黄色的强度与样品中内毒素的含量成正比,通常使用分光光度计在 405 nm 的吸光度下进行测量。

屏幕截图 2025-11-03 142857.png

制备方法
鲎试剂三肽
在制备方式上可以通过两种途径获取。
1.从鲎血细胞中提取天然成分,经分离纯化得到具有活性的三肽。

2.通过固相合成技术,按照特定氨基酸序列逐步连接,精确控制三肽的结构。

因为鲎资源的保护政策(浙江、福建、广东和广西等省已将其列为“ 省级重点保护水生野生动物”/香港于2012年底颁布法规禁止底拖捕捞作业,且提取过程复杂,难度较大,第一种方法的成本也会相对较高。所以现在普遍采用固相合成,按照特定氨基酸序列逐步连接,能够精确控制三肽的结构,该方法不仅能保证产品的稳定性和一致性,还可大规模生产,满足制药行业对检测试剂的需求。


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