武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司
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免疫研究好帮手!Elabscience 小鼠脾脏 Treg 检测方案,解决分群与补偿难题

发布人:武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司

发布日期:2025/10/14 11:04:16

CD127  VS  Foxp3

虽然Foxp3是目前公认的调节性T细胞最特异的指标,但因其位于细胞内,使得Foxp3的染色必须要固定细胞并破核膜,因此这种方法并不适用于分离活的Tregs,且该方法比较传统,操作相对复杂,稍有不慎就会影响实验结果

而CD127属于细胞表面Marker,无需固定破膜。因此,当前主流方向是通过CD127来检测人Tregs。

CD127的发现

CD127是2006年被发现的一种检测CD4+CD25+调节性T细胞的新指标。由于不需要将细胞固定破膜处理,检测起来要比Foxp3方便。

研究发现,CD4+CD25+纯化的细胞中,CD127与Foxp3的表达呈负相关。通过CD4+CD127low纯化出的CD4+CD25+ T细胞,与Foxp3纯化的CD4+CD25+ T细胞数量相似,并且这部分细胞展现了CD4+CD25+调节性T细胞的典型特征。CD4+CD25+CD127-/low是较CD4+CD25+Foxp3+更优的特异性检测Tregs的表面标记分子

配色方案

细胞亚群

种属

指标
荧光标记
克隆号

Treg

Human

CD45

Elab Fluor® Violet 450

HI30

CD3

Elab Fluor® Red 780

OKT3

CD4

FITC

RPA-T4

CD8a

PerCP/Cyanine5.5

OKT-8

CD25

PE

BC96

CD127

Elab Fluor® 647

A019D5

 

人Treg鉴定所需流式抗体

产品名称

荧光素

货号
规格

Elab Fluor® Violet 450

E-AB-F1137Q

20T

Elab Fluor® Red 780

20T

PerCP/Cyanine5.5

20T

Elab Fluor® 647

20T

 

 

人Treg鉴定所需辅助试剂

作用

货号

名称
规格

Cell Staining Buffer

100mL

10×ACK Lysis Buffer

100mL


目的

样本

设置

调电压

1

Blank(空白管)

调补偿

2

CD45-Elab Fluor® Violet 450

3

CD3-Elab Fluor® Red 780

4

CD4-FITC

5

CD8a-PerCP/Cyanine5.5

6

CD25-PE

7

CD127-Elab Fluor®647

Full Panel

8

CD45-Elab Fluor® Violet 450、CD3-Elab Fluor® Red 780、CD4-FITC、CD8a-PerCP/Cyanine5.5、CD25-PE、CD127-Elab Fluor®647

指标

荧光标记

克隆号

货号

CD45

Elab Fluor® Violet 450

HI30

CD3

Elab Fluor® Red 780

OKT3

CD4

FITC

RPA-T4

CD8a

PerCP/Cyanine5.5

OKT-8

CD25

PE

BC96

CD127

Elab Fluor®647

A019D5

人外周血Treg(6色)检测

1. 传统的通过检测Foxp3鉴定Treg的方法操作相对复杂,且固定破膜步骤对实验者要求较高,目前流行通过CD127来检测人Treg。

2. 增加CD45指标,便于淋巴细胞圈门,直接通过CD45和SSC圈出淋巴细胞门,分析CD4+CD25+CD127-/low的细胞比例,正常人外周血中Treg细胞在淋巴细胞中占比为3%~10%。

3. 需要设置单阳管用于调节补偿。


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