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NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱

发布人:上海宾穗生物科技有限公司

发布日期:2025/5/24 6:37:16

"NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【形态特性】
NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱上皮细胞样或成纤维细胞样或淋巴母细胞样
【NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱英文别名】
H1781; H-1781; NCIH1781
【背景信息】
NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱详见相关文献介绍
烘箱(干燥箱)的干热灭菌功能对玻璃器皿至关重要。鼓风式设计确保160℃高温下热量均匀分布,但操作中存在三个技术要点:一是必须同步启动鼓风与加热功能,避免局部过热;二是100℃以下才能开启箱门,防止玻璃器皿因骤冷破裂;三是需使用耐高温牛皮纸包裹器械,普通棉质材料在高温下碳化产生的微粒可能影响细胞贴壁。有新研发的真空烘箱将灭菌时间缩短30%,同时降低能源消耗。
公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库,细胞系体外培养,它们会成长为单层细胞,附着或紧贴在培养瓶上,或悬浮在体外的溶液中,细胞系复苏周期短,公司细胞系状态良好,饱满,有光泽等优点。EDTA的作用:许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白,胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于整联蛋白的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果5min还消化不下来的话),而应该想其它办法。
【换液周期】
NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
【物种来源】
NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【生长特性】
NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱贴壁生长或悬浮生长
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【传代比例】
1:2-1:4(NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
在实际应用中,不同细胞系需要定制化的冻存方案。例如,悬浮细胞比贴壁细胞更易冻存;原代细胞比永生化细胞系更脆弱;某些特殊细胞株可能需要特殊的保护剂组合。实验室间的细胞交换更凸显标准化冻存流程的重要性。国际细胞库提供的标准操作流程值得借鉴,包括使用无血清冻存培养基、严格控制降温速率等细节。统计表明,采用标准化冻存流程可使细胞复苏存活率提升至90%以上,而随意操作可能导致存活率不足50%。
准确判断胰酶消化是否完成,首先,观察细胞形态变化是判断胰酶消化程度的重要依据。在加入胰酶后,随着消化的进行,原本贴壁生长的细胞会逐渐变圆。当大部分细胞呈现出圆形,且细胞之间的连接变得松散时,说明消化正在进行中。如果细胞完全脱离培养瓶底部,变成单个的圆形细胞悬浮在消化液中,这通常是消化完成的一个重要标志。此时,在显微镜下观察,细胞应该是圆润、饱满且边界清晰的。其次,可以通过轻轻拍打培养瓶或轻轻晃动培养板来辅助判断。如果细胞很容易从瓶底或板底脱落并在液体中悬浮,说明消化程度可能已经比较合适。但要注意动作要轻柔,避免过度剧烈的晃动对细胞造成损伤。
【培养观察】
定期观察NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞复苏率高|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
在细胞培养实验中,细胞的生长状态和数量之间的关系是一个需要仔细考量的问题。不同类型的细胞对生长密度的要求各不相同,这直接影响到细胞的形态、增殖速度以及后续实验结果的可靠性。例如,内皮细胞这类生长速度较慢的细胞,通常需要较高的初始接种密度才能保持良好的生长状态。而巨噬细胞和某些肿瘤细胞则恰恰相反,它们在数量较少时反而表现出更好的生长态势,尤其是巨噬细胞,其贴壁速度快,若传代时留存量过多,容易导致细胞过早老化或形态异常。
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bEnd.3+RFP Cells小鼠脑微血管内皮细胞传代性好|STR图谱
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HCC1428 Cells人乳腺腺癌细胞传代性好|STR图谱
TK6 Cells人成淋巴细胞传代性好|STR图谱
RPMI 8226/S细胞复苏实验室;背景说明:来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。;传代方法:按1:2传代,5-6小时可以看到细胞分裂;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:AC16 [Human hybrid]细胞复苏实验室、NCIH1650细胞复苏实验室、PANC-1细胞复苏实验室
C3H-10T1/2细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MUTZ-3细胞复苏实验室、ATN1细胞复苏实验室、Hs 281.T细胞复苏实验室
P3J-HR-1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每2-3天换液;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:HFF1细胞复苏实验室、HIEC6细胞复苏实验室、MCF7-GFP细胞复苏实验室
NCIH526细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次。;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:上皮细胞;相关产品有:Panc8.13细胞复苏实验室、WERI Rb-1细胞复苏实验室、ATC241细胞复苏实验室
MHCC-LM3细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:C-28I2细胞复苏实验室、JROECL19细胞复苏实验室、Hs934T细胞复苏实验室
UM-UC-3细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:16HBEo-细胞复苏实验室、A704细胞复苏实验室、AN3CA细胞复苏实验室
MOLT 16细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:R.K.13细胞复苏实验室、HANK1细胞复苏实验室、NS20-Y细胞复苏实验室
MCA205细胞复苏实验室;背景说明:纤维肉瘤;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:JB-6细胞复苏实验室、COLO 320DM细胞复苏实验室、293c18细胞复苏实验室
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SW1990细胞复苏实验室;背景说明:胰腺癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SNU1040细胞复苏实验室、CACO2细胞复苏实验室、C-4I细胞复苏实验室
UM-UC3细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:HEC1A细胞复苏实验室、H1299细胞复苏实验室、HD-LM-2细胞复苏实验室
MN60细胞复苏实验室;背景说明:B细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:COLO-679细胞复苏实验室、VMRCRCZ细胞复苏实验室、WISH细胞复苏实验室
IFRS1细胞复苏实验室;背景说明:雪旺 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SNU-423细胞复苏实验室、GM06141细胞复苏实验室、TE13细胞复苏实验室
TALL 1细胞复苏实验室;背景说明:该细胞源于一名复发T-ALL(急性T淋巴细胞性白血病)的儿童的外周血;具有很强的细胞毒性,体内体外实验中都能破坏肿瘤细胞;IL-2可使细胞更好地生长;α/β TCR阳性,γ/δ TCR阴性;可产生IFNγ、TNF-α和GM-CSF。;传代方法:维持细胞密度在4×105-1×106 cells/ml之间,2-3天换液1次 ;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:Michigan Cancer Foundation-12F细胞复苏实验室、SW837细胞复苏实验室、MPC-5细胞复苏实验室
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TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞复苏实验室;背景说明:该细胞源于一名复发T-ALL(急性T淋巴细胞性白血病)的儿童的外周血;具有很强的细胞毒性,体内体外实验中都能破坏肿瘤细胞;IL-2可使细胞更好地生长;α/β TCR阳性,γ/δ TCR阴性;可产生IFNγ、TNF-α和GM-CSF。;传代方法:维持细胞密度在4×105-1×106 cells/ml之间,2-3天换液1次 ;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:NCI-1155细胞复苏实验室、H-2052细胞复苏实验室、Panc05.04细胞复苏实验室
HCoEpiC细胞复苏实验室;背景说明:结肠上皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:P36细胞复苏实验室、C8D1A细胞复苏实验室、HONE-1细胞复苏实验室
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HPAF/CD18细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MUS-M1细胞复苏实验室、PANC 813细胞复苏实验室、BSC-40细胞复苏实验室
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Huh 7.5.1细胞复苏实验室;背景说明:肝癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LM(TK-)细胞复苏实验室、SuDHL 2细胞复苏实验室、UM2细胞复苏实验室
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