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SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱

发布人:上海弘顺生物科技有限公司

发布日期:2025/5/23 5:33:01

"SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【形态特性】
SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱上皮细胞样或成纤维细胞样或淋巴母细胞样
【SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱英文别名】
SVGp12; SVG(P12)
【背景信息】
SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱详见相关文献介绍
传代培养是细胞培养技术中的关键环节,其核心目的是维持细胞的健康增殖并获取稳定的实验材料。当细胞在培养瓶中生长至80%-90%汇合度时,细胞间的接触抑制和营养竞争会导致生长速率下降,此时必须通过传代操作将细胞分散并重新接种。这一过程不仅解决了培养空间限制问题,还能通过细胞扩增建立可持续研究的细胞株系。然而值得注意的是,反复传代可能导致细胞表型改变,例如间充质干细胞多次传代后可能出现分化能力下降,因此需严格控制传代次数和操作规范。
细胞代谢随温度降低而逐渐减慢。当温度降至冰点以下时,细胞内的游离水会形成冰晶,导致细胞膜和细胞器结构的机械损伤,最终引发细胞死亡。然而,通过添加冷冻保护剂(如二甲亚砜或甘油),可以显著提高细胞在深低温环境下的存活率。这些保护剂能够降低冰晶的形成概率,并减少低温对细胞结构的破坏。
【换液周期】
SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
【物种来源】
SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【生长特性】
SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱贴壁生长或悬浮生长
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【传代比例】
1:2-1:4(SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
对于常规贴壁细胞,标准操作流程应遵循三步原则:首先用PBS润洗去除血清中的酶抑制剂,随后进行胰酶润洗并彻底吸除,最后依靠残留酶在37℃下的短暂作用完成消化。这个过程中,判断消化终点的标准常被错误理解。实际上,当显微镜下观察到细胞层呈现""沙状移动""时,表明细胞-基质和细胞-细胞间的连接均已断裂,此时应立即终止消化。这种状态下的细胞虽未完全离散,但已具备独立分布的特性。值得注意的是,某些肿瘤细胞即使在镜下呈现理想单细胞状态,贴壁后仍会重新聚集,这是由其生物学特性决定的自然现象,强行通过延长消化或剧烈吹打来追求绝对单分散性,只会导致细胞状态持续恶化。
二氧化碳培养箱是细胞培养的核心设备,其内部环境容易滋生细菌和真菌。定期消毒培养箱是预防污染的重要措施。具体操作包括:使用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板,去除可能的污染物。使用可移动的紫外灯对培养箱内部照射至少30分钟,以杀灭残留的微生物。培养箱的水槽用于维持湿度,但长期使用容易滋生微生物。建议使用高压灭菌的超纯水,或加入铜离子溶液(如300ml饱和硫酸铜溶液与3 L灭菌超纯水混合),利用铜离子的抑菌作用减少污染风险。
【培养观察】
定期观察SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞复苏率高|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
传代消化是细胞培养的关键步骤,但许多新手因担心胰酶损伤细胞而过早终止消化。实际上,适度延长消化时间(如等待细胞完全变圆)反而能减少机械吹打对细胞的伤害。过早终止消化会导致细胞未完全脱离,用力吹打产生的气泡和剪切力对细胞的损伤远大于胰酶本身。常规操作中,建议在显微镜下监控消化过程,待80%-90%细胞变圆后轻柔晃动培养瓶,使细胞自然脱落。此外,吹打时应避免产生气泡,因为气泡破裂时的机械应力会直接损伤细胞膜。
常见细胞贴壁较弱原因:在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象,此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养,若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种;建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞,尽量避免接触低温或密度过高。
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Strain L-929细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LED-WiDr细胞复苏实验室、H1915细胞复苏实验室、MT-4细胞复苏实验室
KP-N-NS细胞复苏实验室;背景说明:源自脑转移灶的肾上腺神经母细胞瘤。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CV 1细胞复苏实验室、NTERA-2cl.D1细胞复苏实验室、OVCAR420细胞复苏实验室
H378细胞复苏实验室;背景说明:小细胞肺癌;胸腔积液转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:McA-RH 8994细胞复苏实验室、H-929细胞复苏实验室、293H细胞复苏实验室
Calu3细胞复苏实验室;背景说明:该细胞是从一名25岁的白人男性肺腺癌患者的胸水中分离建立的;该患者曾使用过环磷酰胺、博来霉素、阿霉素进行治疗。该细胞接种至裸鼠可成瘤;可作转染宿主。;传代方法:消化20分钟。1:2。5-6天长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:PY8119细胞复苏实验室、CV1细胞复苏实验室、TM3细胞复苏实验室
H661细胞复苏实验室;背景说明:该细胞1982年建系,源自一位患有大细胞肺癌的男性的胸腔积液。该细胞角蛋白、波形蛋白阳性。;传代方法:1:3—1:5传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:ABC1细胞复苏实验室、BHK21细胞复苏实验室、TSUpr1细胞复苏实验室
U-138MG细胞复苏实验室;背景说明:星形细胞瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NS-20Y细胞复苏实验室、PC-9S1细胞复苏实验室、HFTF细胞复苏实验室
TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞复苏实验室;背景说明:该细胞源于一名复发T-ALL(急性T淋巴细胞性白血病)的儿童的外周血;具有很强的细胞毒性,体内体外实验中都能破坏肿瘤细胞;IL-2可使细胞更好地生长;α/β TCR阳性,γ/δ TCR阴性;可产生IFNγ、TNF-α和GM-CSF。;传代方法:维持细胞密度在4×105-1×106 cells/ml之间,2-3天换液1次 ;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:NCI-1155细胞复苏实验室、H-2052细胞复苏实验室、Panc05.04细胞复苏实验室
LS-174T细胞复苏实验室;背景说明:LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代,象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。 电镜研究表明有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。 直肠抗原3阳性。 p53抗原表达阴性,但mRNA表达阳性。 与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤。LS 174T细胞角蛋白染色阳性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表达呈阳性。 癌基因k-ras和sis的表达未做检测。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:H4-II-EC3细胞复苏实验室、NCIH1869细胞复苏实验室、SKCol1细胞复苏实验室
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SNU668细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Malme-3M细胞复苏实验室、H-446细胞复苏实验室、DU 4475细胞复苏实验室
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MV(4;11)细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PC12(高分化)细胞复苏实验室、WISH细胞复苏实验室、451-LU细胞复苏实验室
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