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bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱

发布人:上海冠导生物工程有限公司

发布日期:2025/5/21 8:10:21

"bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【形态特性】
bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱上皮细胞样
【bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱英文别名】
bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3; BEND-3; BEND3; brain-derived Endothelial cells.3
【背景信息】
bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱详见相关文献介绍
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术,其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中,细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落,影响后续传代效率;而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明,细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟,具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面,当使用较高浓度(0.25%胰酶-EDTA)时,消化时间应缩短至1-2分钟;若使用较低浓度(0.05%),则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化,当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
血清作为细胞培养基的重要成分,为细胞生长提供了必需的营养物质和生长因子。当细胞增殖速率异常时,可考虑逐步提高血清浓度至15-20%。这一范围的血清浓度能够为细胞提供更丰富的营养支持,促进其增殖。然而,这一过程必须谨慎进行。建议将血清浓度的提升分为2-3个阶段,每个阶段维持3-5天,让细胞有足够的时间适应新的环境。例如,可以从常规的10%血清浓度开始,先提升至12-15%,观察细胞状态后再决定是否继续提高至15-20%。
【换液周期】
bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
【物种来源】
bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【生长特性】
bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱贴壁生长
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【传代比例】
1:2-1:4(bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
细胞复苏快速解冻技术要点:将冻存管转移至水浴时应保持45°角倾斜,避免管口朝向操作者。每15秒轻柔涡旋震荡一次,此操作可使解冻时间缩短至90秒内。值得注意的是,当管内液体仅剩最后冰晶时(约占总体积5%),应立即移出水浴,此时细胞处于最佳存活临界点。
二氧化碳培养箱是细胞培养的核心设备,其内部环境容易滋生细菌和真菌。定期消毒培养箱是预防污染的重要措施。具体操作包括:使用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板,去除可能的污染物。使用可移动的紫外灯对培养箱内部照射至少30分钟,以杀灭残留的微生物。培养箱的水槽用于维持湿度,但长期使用容易滋生微生物。建议使用高压灭菌的超纯水,或加入铜离子溶液(如300ml饱和硫酸铜溶液与3 L灭菌超纯水混合),利用铜离子的抑菌作用减少污染风险。
【培养观察】
定期观察bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化bEnd.3 Cells小鼠脑血管内皮瘤细胞复苏率高|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
常见细胞贴壁较弱原因:在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象,此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养,若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种;建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞,尽量避免接触低温或密度过高。
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YD38细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:AG06814-J细胞复苏实验室、OVCAR-8/ADR细胞复苏实验室、143B细胞复苏实验室
TE354.T细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:S.B.细胞复苏实验室、HCC44细胞复苏实验室、RS1细胞复苏实验室
GM 2132细胞复苏实验室;背景说明:来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。;传代方法:按1:2传代,5-6小时可以看到细胞分裂;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:GM04154B细胞复苏实验室、GI-1细胞复苏实验室、EFM-192A细胞复苏实验室
FK81细胞复苏实验室;背景说明:肾;自发永生;雌性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:TK-10细胞复苏实验室、DMS53细胞复苏实验室、A375SM细胞复苏实验室
GM03671细胞复苏实验室;背景说明:G.E. Foley 等人建立了类淋巴母细胞细胞株CCRF-CEM。 细胞是1964年11月从一位四岁白人女性急性淋巴细胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。此细胞系从香港收集而来。;传代方法:1:2传代。3天内可长满。;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:TE-3A细胞复苏实验室、NCI-H295R细胞复苏实验室、E304细胞复苏实验室
CEM-C7细胞复苏实验室;背景说明:急性T淋巴细胞白血病;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CAL120细胞复苏实验室、NOMO-1细胞复苏实验室、Farage OL细胞复苏实验室
JVM2细胞复苏实验室;背景说明:该细胞是 J.V.Melo从一位63岁患有套细胞淋巴瘤白人女性外周血中分离建立的,经EBV介导获得永生化,该细胞表达p16和细胞周期蛋白D2,低水平表达细胞周期蛋白D1。;传代方法:1:3传代,2-3天传一代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:YES-2细胞复苏实验室、MES-SA/Dx-5细胞复苏实验室、SKHEP1细胞复苏实验室
HCCC9810细胞复苏实验室;背景说明:HCCC-9810细胞株源自一位女性肝胆管细胞癌患者。 HCCC-9810细胞呈上皮细胞样,染色体模式数为71,但染色体数目可以在22-117的范围内变动。倍增时间为20.4小时。 AFP,CEA和CA19-9的分泌水平低,在裸鼠中的成瘤率为20%。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:Hs 840.T细胞复苏实验室、MEL细胞复苏实验室、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞复苏实验室
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P3X63Ag8细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HEK293A细胞复苏实验室、SCC-7细胞复苏实验室、SNU407细胞复苏实验室
D 407细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCT 15细胞复苏实验室、293 HEK细胞复苏实验室、ECC12细胞复苏实验室
Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞复苏实验室;背景说明:该细胞从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立。该细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞,细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白,表达C3R和FcR;可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化;可作为转染宿主。;传代方法:维持细胞浓度在2-4×105-8×105/ml,勿超过1×106/ml;2-3天换液1次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:单核细胞;相关产品有:NCIH2107细胞复苏实验室、NCI-H1581细胞复苏实验室、NFS-60细胞复苏实验室
EFO27细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCIH2171细胞复苏实验室、H1417细胞复苏实验室、Balb/c 3T3细胞复苏实验室
SUDHL-8细胞复苏实验室;背景说明:弥漫大B淋巴瘤;腹腔积液转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SK-MEL-1细胞复苏实验室、OCI-Ly18细胞复苏实验室、LS123细胞复苏实验室
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KP-2细胞复苏实验室;背景说明:胰腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NBL-S细胞复苏实验室、Colo-206F细胞复苏实验室、NCI-SNU-16细胞复苏实验室
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