Ca759细胞：小鼠乳腺癌细胞系

"Ca759细胞：小鼠乳腺癌细胞系
细胞背景资料：乳腺癌；雌性
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞培养基应用选择：选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：(１)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。(２)其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。(３)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI１６４０。(４)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择培养基，这是最客观的方法，但比较繁琐。以下是部分细胞常用的培养条件：２９３人胚胎肾细胞培养条件：MEM,１０%热灭活马血清；IMR-９０人肺成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清和NEAA；W１-３８人胚胎肺成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；A５４９人肺癌上皮细胞培养条件：F-１２K,１０%胎牛血清；A４３１人表皮癌细胞培养条件：DMEM,１０%胎牛血清；BHL-１００人乳房上皮细胞培养条件：McCoy'５A, １０%胎牛血清；BeWo人绒毛癌上皮滋养层细胞培养条件：F-１２K,１５%胎牛血清；Caco-２人结肠腺癌上皮细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清和NEAA；Chang人肝脏上皮细胞培养条件：BME,１０%小牛血清；HCT-１５人结肠直肠腺癌上皮细胞培养条件：RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；HEp-G２人肝细胞癌上皮细胞培养条件：MEM,１０% 胎牛血清和NEAA；HEp-２人喉癌上皮细胞培养条件：MEM,１０% 胎牛血清;或RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；HT-２９人结肠腺癌上皮细胞培养条件：McCoy'５A,１０%胎牛血清；JEG-２人绒毛膜癌上皮细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；KB人口腔癌上皮细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清和NEAA；Saos-２人骨肉瘤上皮细胞培养条件：McCoy'５A,１５%胎牛血清；WI-３８人胚胎肺上皮细胞培养条件：BME,１０%胎牛血清；WISH人羊膜上皮细胞培养条件：BME, １０%胎牛血清；HUVEC人脐带内皮细胞培养条件：F-１２K,１０%胎牛血清和肝素１００ug/ml；IM-９人骨髓瘤成淋巴细胞培养条件：RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；Daudi人淋巴瘤细胞培养条件：RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；Clone M-３小鼠黑素瘤上皮细胞培养条件：F-１０,１５%马血清和２.５%胎牛血清；BHK-２１仓鼠肾成纤维细胞培养条件：GMEM,１０%胎牛血清或MEM,１０%胎牛血清和NEAA；CHO-K１仓鼠卵巢上皮细胞培养条件：F-１２,１０%胎牛血清；IEC-６大鼠正常小肠上皮样培养条件：DMEM,５%胎牛血清,胰岛素０.１μg/ml；COS-１猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；COS-３猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；COS-７猴非洲绿猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清
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