NCI-H125细胞：人非小细胞肺癌细胞系

"NCI-H125细胞：人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：腺鳞状肺癌；男性
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
H-508细胞系相关产品：LLCPK1细胞、NCIH727细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品：HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
TE-12细胞系相关产品：SKNBE细胞、U2-OS细胞、SuDHL 1细胞
Hs 863.T细胞系相关产品：CHO-Lec1细胞、A431细胞、WEHI-231细胞
RPMI 2650细胞系相关产品：JIMT细胞、HuLEC-5a细胞、H-735细胞
TE353.SK细胞系相关产品：Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞
58F细胞系相关产品：BNL CL2细胞、H1395细胞、NCI-H2135细胞
NBL-5细胞系相关产品：RPMI no. 8226细胞、PL-12细胞、32D clone 3细胞
Karpas-422细胞系相关产品：Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞
RMS 13细胞系相关产品：NCI-H1793细胞、EBC1细胞、LC-1Sq细胞
SN12-PM6细胞系相关产品：Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品：THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞
G 401细胞系相关产品：PC-9细胞、HO8910细胞、HEB细胞
HuH-6细胞系相关产品：CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
SUDHL2细胞系相关产品：L-M (TK-)细胞、SV-HUC细胞、NCTC929细胞
CV-1 in Origin Simian-1细胞系相关产品：H-1993细胞、PG-4 (S+L-)细胞、TF-1a细胞
Super Tube细胞系相关产品：SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
H1563细胞系相关产品：GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
HMrSV5细胞系相关产品：CL11细胞、NCIH1437细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞
Hs729T细胞系相关产品：NIHOVCAR3细胞、EJ细胞、MDA361细胞
OCI/AML-3细胞系相关产品：MDST8细胞、293FT细胞、He La细胞
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞
T47D:A细胞系相关产品：PL-45细胞、FLC7细胞、OACP4 C细胞
SHP77细胞系相关产品：HS-683细胞、PFSK细胞、TE-10细胞
HLE-B3细胞系相关产品：2PK-3细胞、HTSMC细胞、RPE-hTERT细胞
RCC23细胞系相关产品：L 929细胞、BHK-21细胞、HCC-1438细胞
Bac1 2F5细胞系相关产品：X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞
LIXC-002细胞系相关产品：B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞
M-NFS-60细胞系相关产品：ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞
EC-9706细胞系相关产品：LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞
SCCVII细胞系相关产品：U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
MB468细胞系相关产品：Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞
NCIH226细胞系相关产品：H-524细胞、LTPA细胞、COLO320DM细胞
ARO细胞系相关产品：2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞
OCI-LY-19细胞系相关产品：CCD-18Co细胞、A-427细胞、NCIH2452细胞
C1498细胞系相关产品：EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
GA-10细胞系相关产品：NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞
CCRF-CEM/S细胞系相关产品：Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
HEK 293 c18细胞系相关产品：HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
HT 1080.T细胞系相关产品：SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞系相关产品：SCC VII细胞、OCI/AML5细胞、MONO-MAC 6细胞
CRFK细胞系相关产品：TCC-PAN2细胞、JVM3细胞、NCI.H522细胞
H1755细胞系相关产品：Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞
FM88细胞系相关产品：BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
ME 180细胞系相关产品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、RD 2细胞、IR 983F细胞
MHH-CALL-2细胞系相关产品：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
SK-OV-3细胞系相关产品：WM-239-A细胞、TCMK1细胞、NCIH2405细胞
AN3 CA细胞系相关产品：BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞
SW-1116细胞系相关产品：CL1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、MODE-K细胞
CL1-0细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、NCIADR.RES细胞、PK(15)细胞
MLE-12细胞系相关产品：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞
P1-Raji细胞系相关产品：RCC-10RGB细胞、MG-HU-3细胞、OCI-AML-5细胞
H-209细胞系相关产品：253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞
PTK 1细胞系相关产品：Medical Research Council cell strain-9细胞、SKRC-42细胞、SHI-1细胞
RPMI7666细胞系相关产品：MFD-1细胞、EFM192C细胞、Panc_05_04细胞
HS940细胞系相关产品：Panc_02_03细胞、Anip-973细胞、A-9细胞
X63-AG 8.653细胞系相关产品：LAN-5细胞、OVCAR433细胞、H-157细胞
COLO_320DM细胞系相关产品：HANK-1细胞、SUDHL-8细胞、H22细胞
SNU-251细胞系相关产品：NSC-34细胞、751-NA-15细胞、CPA 47细胞
Nthy-ori 3.1细胞系相关产品：CL 1-5细胞、LLC-PK(1)细胞、IPEC1细胞
J82 COT细胞系相关产品：TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞
R-1059-D细胞系相关产品：DanG细胞、C41细胞、RBL-1细胞
BAR-T细胞系相关产品：HEK-293F细胞、H22-H8D8细胞、CWR-22rv1细胞
SUM-52细胞系相关产品：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞
MGHU3细胞系相关产品：MOLT.4细胞、WM-115细胞、NCIH1963细胞
Tu-177细胞系相关产品：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞
OCM1A细胞系相关产品：686LN-M4e细胞、C-Lu-65细胞、HUT 226细胞
KNS-81细胞系相关产品：H-1876细胞、RS1细胞、BRL 3A细胞
SW954细胞系相关产品：KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞
PC-12细胞系相关产品：SW-13细胞、Cor L51细胞、A549ATCC细胞
MDA-MB-157细胞系相关产品：A 172细胞、C32r细胞、HCT/FU细胞
TE-12细胞系相关产品：SKNBE细胞、OCI-Ly3细胞、Duke University 145细胞
NWA细胞系相关产品：Colo-201细胞、MAEC细胞、HEC-1B细胞
"