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发布人:上海宾穗生物科技有限公司
发布日期:2020/7/12 14:23:41
"LSC-1细胞:大鼠肝星形细胞系
细胞背景资料:肝星形细胞;自发永生;Wistar
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:贴壁
目前,跟公司签订长期战略合作伙伴的科研单位有山西中医学院、福建医科大学附属第二医院、上海市第六人民医院、北京大学医学部、同济大学、四平中心医院、广州中医药大学、中科院上海生命科学研究院生化与细胞研究所、解放军第306医院、江南大学、西南医院、吉首大学、西南大学化学化工学院、宁波大学、福建医科大学附属医院、苏州市同济医院、中南大学、延安大学附属医院、中国科学院上海药物研究所、天津市儿童医院、江苏省中医药研究院、湘雅医学院、第四军医大学预防系劳动与环境教研室、扬州大学、上海交通大学、中国医科大学、浙江省立同德医院、中国人民解放军第150中心医院、苏州大学、四川大学华西医院、云南大学、扬州大学兽医学院、上海交通大学医学院附属第九人民医院、海南医学院、江苏肿瘤医院、上海市闵行区中心医院、大连医科大学附属医院、中国科学院广州生物医药与健康研究院、沈阳药科大学、广州市第八人民医院、南京大学、浙江中医药大学、兰州大学、上海中医药大学、中国农业科学院饲料研究所、厦门市妇幼保健院、大学、南京军区总医院、天津市人民医院、北京医学科学肿瘤医院、上海市同济医院、江苏大学、桂林医学院附属医院、中国科学院化学研究所
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞培养基应用选择:选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。以下是部分细胞常用的培养条件:293人胚胎肾细胞培养条件:MEM,10%热灭活马血清;IMR-90人肺成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清和NEAA;W1-38人胚胎肺成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;A549人肺癌上皮细胞培养条件:F-12K,10%胎牛血清;A431人表皮癌细胞培养条件:DMEM,10%胎牛血清;BHL-100人乳房上皮细胞培养条件:McCoy'5A, 10%胎牛血清;BeWo人绒毛癌上皮滋养层细胞培养条件:F-12K,15%胎牛血清;Caco-2人结肠腺癌上皮细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清和NEAA;Chang人肝脏上皮细胞培养条件:BME,10%小牛血清;HCT-15人结肠直肠腺癌上皮细胞培养条件:RPMI-1640,10%胎牛血清;HEp-G2人肝细胞癌上皮细胞培养条件:MEM,10% 胎牛血清和NEAA;HEp-2人喉癌上皮细胞培养条件:MEM,10% 胎牛血清;或RPMI-1640,10%胎牛血清;HT-29人结肠腺癌上皮细胞培养条件:McCoy'5A,10%胎牛血清;JEG-2人绒毛膜癌上皮细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;KB人口腔癌上皮细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清和NEAA;Saos-2人骨肉瘤上皮细胞培养条件:McCoy'5A,15%胎牛血清;WI-38人胚胎肺上皮细胞培养条件:BME,10%胎牛血清;WISH人羊膜上皮细胞培养条件:BME, 10%胎牛血清;HUVEC人脐带内皮细胞培养条件:F-12K,10%胎牛血清和肝素100ug/ml;IM-9人骨髓瘤成淋巴细胞培养条件:RPMI-1640,10%胎牛血清;Daudi人淋巴瘤细胞培养条件:RPMI-1640,10%胎牛血清;Clone M-3小鼠黑素瘤上皮细胞培养条件:F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清;BHK-21仓鼠肾成纤维细胞培养条件:GMEM,10%胎牛血清或MEM,10%胎牛血清和NEAA;CHO-K1仓鼠卵巢上皮细胞培养条件:F-12,10%胎牛血清;IEC-6大鼠正常小肠上皮样培养条件:DMEM,5%胎牛血清,胰岛素0.1μg/ml;COS-1猴肾成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;COS-3猴肾成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;COS-7猴非洲绿猴肾成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品:52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
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