FL 62891细胞：人肝细胞系

"FL 62891细胞：人肝细胞系
细胞背景资料：肝；SV４０转化；男性
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁
如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
P3X63NS1细胞系相关产品：KYSE 30细胞、RSC 96细胞、VP 267细胞
G-401细胞系相关产品：NCIH889细胞、OC316细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞
UCLA SO M21细胞系相关产品：MAVER-1细胞、Mono Mac 6细胞、SF-295细胞
LICR-LON-HN6细胞系相关产品：NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞
EOMA细胞系相关产品：P3/NSI/1-AG4-1细胞、OB2细胞、H-548细胞
NCIH1105细胞系相关产品：ST 486细胞、CT26.WT细胞、H-1299细胞
alpha TC1 clone 6细胞系相关产品：Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞
H1650_CO细胞系相关产品：SNGM细胞、SW948细胞、H295R细胞
L M (TK-)细胞系相关产品：UT-7细胞、FRTL-5细胞、58F细胞
LY-R细胞系相关产品：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
SKNEP细胞系相关产品：U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞
NCI-H322T细胞系相关产品：Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞
H526细胞系相关产品：PLCPRF5细胞、HMy2.CIR细胞、GTL-16细胞
HS-766-T细胞系相关产品：HuCCT-1细胞、COLO 394细胞、ONS-76细胞
GM346细胞系相关产品：LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
Duke University 4475细胞系相关产品：SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞
Duke University 4475细胞系相关产品：SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞
U2932细胞系相关产品：RL95细胞、Rat-1细胞、HUT-226细胞
HPAC细胞系相关产品：JVM-3细胞、H2198细胞、YES2细胞
MDA 1386细胞系相关产品：LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞
MOLM13细胞系相关产品：CAL 85-1细胞、HCC-1954BL细胞、Hep-3B细胞
OCIAML3细胞系相关产品：BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞
32D clone3细胞系相关产品：A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
Hs 611.T细胞系相关产品：PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、P3/X63-Ag8细胞、HPAF/CD18细胞
A431/P细胞系相关产品：NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞
EC-109细胞系相关产品：HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞
SW-948细胞系相关产品：SW 1573细胞、CL-34细胞、SKG-3a细胞
AR4-IP细胞系相关产品：S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
3T3-F442A细胞系相关产品：rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞
CMT.64细胞系相关产品：Mv.1.Lu细胞、NCI-H2135细胞、Mel-RM细胞
D407 RPE细胞系相关产品：NCI H508细胞、SuDHL 10细胞、GM05384细胞
SW-962细胞系相关产品：H2126细胞、Jiyoye (P-2003)细胞、CFPAC1细胞
EC9706细胞系相关产品：EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞
H-187细胞系相关产品：Hs27F细胞、MDA-MB468细胞、JTC-39细胞
NT2D1细胞系相关产品：GAK细胞、NL20SV细胞、D10细胞
KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞
H841细胞系相关产品：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞
NuTu 19细胞系相关产品：RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
PNT1-a细胞系相关产品：DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞
EB2细胞系相关产品：CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞
RC-K8细胞系相关产品：HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
F9细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
Rin-M-5F细胞系相关产品：HuP-T3细胞、HCC-1806细胞、EOC-20细胞
C-28/I2细胞系相关产品：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞
GTL-16细胞系相关产品：H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
SCC 25细胞系相关产品：NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞
H9c2(2-1)细胞系相关产品：MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞
HCC-1395细胞系相关产品：SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞
32Dcl3细胞系相关产品：NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞
Hs-600-T细胞系相关产品：H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
H146细胞系相关产品：NCTC 3960细胞、CWR22-Rv1细胞、HFLS-OA细胞
Roswell Park Memorial Institute 1846细胞系相关产品：PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞
PK (15)细胞系相关产品：GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞
DBTRG-05MG细胞系相关产品：EBTr细胞、HB611细胞、NCI-SNU-216细胞
Balb/c 3T3细胞系相关产品：ACCM细胞、NRK细胞、TOV-21G细胞
SO-Rb 50细胞系相关产品：293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞
MES-SA-Dx5细胞系相关产品：CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞
GM00346B细胞系相关产品：ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞
H-128细胞系相关产品：NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞
Rat Basophilic Leukemia-1细胞系相关产品：Sp2/O-Ag14细胞、PG-LH7细胞、CAL-27细胞
OP9细胞系相关产品：SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞
H-1563细胞系相关产品：NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞
H184A1细胞系相关产品：28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞
EJ细胞系相关产品：Hepa-RG细胞、SNT8细胞、CORL105细胞
End1/E6E7细胞系相关产品：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
P3HRI细胞系相关产品：SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
TYKnu细胞系相关产品：NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞
MC38细胞系相关产品：QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
H2009细胞系相关产品：MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞
SUSM-1细胞系相关产品：NCIH2073细胞、IALM细胞、SPCA1细胞
MB-49细胞系相关产品：HT29细胞、QGY细胞、IEC-6细胞
UCLA SO M21细胞系相关产品：MAVER-1细胞、PANC-04-03细胞、RPVSMC细胞
Karpas-299细胞系相关产品：SW-626细胞、143B细胞、MyLa2059细胞
"