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聚丙烯酰胺凝胶电泳 可用于蛋白和寡核苷酸的分离，最常用于蛋白质的分离，这里总结了DNA电泳专用的各种浓度PAGE胶配制的配方及制备方法。 聚丙烯酰胺 凝胶电泳简称为PAGE（Polyacrylamide gel electrophoresis），是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质。聚丙烯酰胺凝胶是由单体的丙烯酰胺（CH2=CHCONH2 Acrylamide）和甲叉双丙烯酰胺（CH2(NHCOHC=CH2) 2 N,N'-methylenebisacrylamide）聚合而成，这一聚合过程需要有自由基催化完成。 各种浓度PAGE胶的配制(DNA电泳用) 50ml体系： 丙烯酰胺 有效分离（bp) 二甲苯青 溴酚蓝 丙烯酰胺30%（ml） 10×TBE（ml) ddH2O（ml） TEMED（µl） 过硫酸铵10%（µl） 3.5% 100-1000 460 100 5.83 5 39.17 25.0 250 5.0% 100-500 260 65 8.33 5 36.67 25.0 250 8.0% 60-400 160 45 13.33 5 31.67 25.0 250 12.0% 40-200 70 20 20.0 5 25.00 25.0 250 15.0% 25-150 60 15 25.0 5 20.00 25.0 250 20.0% 5-100 45 12 33.33 5 11.67 25.0 250 5ml体系： 丙烯酰胺 丙烯酰胺30% （ml） 10×TBE （ml） ddH2O （µl） TEMED （µl） 过硫酸铵10% （µl） 3.5% 0.583 0.5 3.917 2.5 25 5.0% 0.833 0.5 3.667 2.5 25 8.0% 1.333 0.5 3.167 2.5 25 12.0% 2.00 0.5 2.5 2.5 25 15.0% 2.50 0.5 2.0 2.5 25 20.0% 3.333 0.5 1.167 2.5 25 1、丙烯酰胺30%为29：1(质量比，丙烯酰胺：双甲叉丙烯酰胺) 2、TEMED 可以加到1ul/ml。 不同浓度丙烯酰胺和DNA的有效分离范围表 丙烯酰胺(%) 有效分离范围(bp) 溴酚兰* 二甲苯青* 3.5 100～2000 100 460 5.0 80～500 65 260 8.0 60～400 45 160 12.0 40～200 30 70 15.0 25～150 15 60 20.0 10～100 12 45 *表中给出的数字为与指示剂迁移率相等的双链DNA分子 所含碱基对数目(bp). 凝胶的制备过程： 1、 按要求装配好垂直电泳板，两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边，防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。 2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45～60℃角。 3、 按表3配制所需%浓度凝胶的毫升数。 4、 加入TEMED后，立即混匀，缓缓倒入两玻璃板间的胶床中，直到液体接近溢出时为止。 5、 立即插入适当的梳子，密切注意防止梳齿下产生气泡，用一有力的夹将梳子夹在一边的玻璃板上，然后将玻璃板斜靠在物体上，使成10°角，可减少液体泄漏的机会。 6、 室温聚合一小时后，将玻璃板插入电泳槽中，上紧，倒入0.1XTBE缓冲液。 7、 小心取出梳子，加样。 大家可以根据自己试验中DNA片段大小的不同选择配制合适浓度的丙烯酰胺胶。PAGE胶配制过程中记得避免气泡的产生。