武汉佰乐博生物技术有限公司

产品介绍

         AntibodySystem推出哺乳系统重组表达的CU43-Fc (货号：EXX25001)和大肠杆菌重组表达的His-CU43 (货号：YXX25001)，经验证均具有很高的酶活性。

CU43只能特异性切割正确折叠的Human IgG的Ans297位点的N-糖基，IgG变性后无法切割。

图1. CU43活性验证结果

1，3：Human IgG1 Fc
2：Human IgG1 Fc加CU43-Fc
4：Human IgG1 Fc加His-CU43

酶切缓冲液：PBS pH 7.4

酶切条件：4℃，16小时

背景介绍

        自身免疫性溶血性贫血（Autoimmune Hemolytic Anemia, AIHA）和登革热疫苗引起的抗体依赖性增强（Antibody-Dependent Enhancement, ADE）效应都与IgG Asn297位点糖链与FcγR的相互作用相关。切除IgG中Asn297位点的糖链有望改善自身免疫性溶血性贫血，并降低登革热疫苗引起的ADE效应。

         目前切割N-连接糖链的酶主要有PNGase F (YXX04901, AntibodySystem)，Endo S (YXX05201, AntibodySystem)和Endo S2 (YXX06601, AntibodySystem)。PNGase F能切割任意位点的N-连接糖链，无位点特异性；Endo S 特异性切割复杂型N-糖基；Endo S2能够切割IgG上的复杂型，高甘露糖性和杂合型三类N-糖基；特异性切割IgG中Asn297位点的糖链的酶非常罕见。

        2024年10月21日，国际权威学术期刊Cell在线刊发了美国埃默里大学医学院的科研成果，标题为：Potent efficacy of an IgG-specific endoglycosidase against IgG-mediated pathologies。他们通过生物信息学方法筛选到一个可以特异性切割Human IgG中Asn297位点的糖链的糖苷内切酶CU43。

图2. 文章封面

体外实验

        研究人员结合生物信息学预测和质谱鉴定得到了10个糖苷酶，分析了10种糖苷酶的去糖基化效果，发现CU43无法切除RNase B的糖链，但是可以高效切割Human IgG Fc区域的复杂型N-糖链，而对Mouse IgG Fc区域的糖链无法切割。

图3. 体外实验结果

体内实验

        由于CU43在体外具有非常高效的酶切活性和极高的底物特异性，研究人员利用转基因小鼠模型对CU43的体内活性进行研究。研究发现，CU43-Fc能有效防止抗体介导的CD4+ T细胞清除和B细胞清除，能防止抗体介导的自身免疫性溶血性贫血的发生，并且能够阻断登革热病毒抗体介导产生的ADE效应。

图4. 体内实验结果