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发布人:武汉艾美捷科技有限公司
发布日期:2024/7/2 16:08:19
Endo F1能够切割天冬酰胺连接的高甘露糖和一些混合型寡糖。核心的岩藻糖基化会将活性降低50倍。内切糖苷酶F1能够水解含有硫酸根的高甘露糖链。它在寡糖的二乙酰基壳二糖核心中的两个N-乙酰葡萄糖胺残基之间进行切割,生成一个截短的糖分子,该分子在天冬酰胺上保留一个N-乙酰葡萄糖胺残基。与之相反,PNGase F会完整地移除寡糖。
艾美捷QA-Bio-Endo F1:
货号:E-EF01
来源:重组Elizabethkingia miricola(之前称为Chryseobacterium meningosepticum)在大肠杆菌中的来源。
EC编号:EC 3.2.1.96
Endo F1的特异性:切割所有天冬酰胺连接的高甘露糖和一些混合型寡糖。
内容:60微升的小包装,含有1单位的酶,在20 mM Tris-HCl,pH 7.5中。
包含于20微升和60微升包装尺寸:
5倍反应缓冲液 – 250 mM磷酸钠,pH 5.5
比活性:16 U/mg
活性:17 U/ml
分子量:32,000道尔顿
建议用法:向Eppendorf管中加入多达200微克的糖蛋白。用去离子水调整至38微升的最终体积。
加入10微升的5倍反应缓冲液5.5。
加入2.0微升的Endo F1。在37°C下孵化1小时。
比活性:定义为在37°C,pH 5.5下,每分钟催化1微摩尔变性的核糖核酸酶B(RNase B)释放N-连接寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割(切割后的RNase B迁移速度更快)。
储存:将酶储存在4°C。
稳定性:在适当储存条件下至少稳定12个月。几天暴露在环境温度下不会降低活性。
纯度:对内切糖苷酶F1进行污染蛋白酶的测试如下:将10微克的变性牛血清白蛋白(BSA)在37°C下与2微升的酶共同孵化24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析显示没有降解迹象。
生产宿主菌株经过广泛测试,不产生任何可检测的糖苷酶。
额外的Endo F产品:
内切糖苷酶F2能够释放双天线和高甘露糖糖基(速率降低40倍)
内切糖苷酶F3能够释放三天线和岩藻糖基化的双天线N-糖基
Endo F多酶套装包括每种Endo F酶及其缓冲液的20微升。
QA-Bio-Endo F1文献参考:
Maley P., R. B. Trimble, A. L. Tarentino and T. H. Plummer Jr. Characterization of glycoproteins and their associated oligosaccharides through the use of endoglycosidases. Anal Biochem 180:195-204 (1989).
Plummer, T. H. Jr, A. W. Phelan and A. L. Tarentino. Porcine fibrinogen glycopeptides: substrates for detecting endo-N-acetylglucosaminidases F2 and F3. Anal Biochem 235:98-101 (1996).
Reddy A., B. G. Grimwood, T. H. Plummer Jr and A. L. Tarentino. High- level expression of the Endo-beta-N- acetylglucosaminidase F2 gene in E.coli: one step purification to homogeneity. Glycobiology 8:633-636 (1998).
艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/QA-Bio-new.shtml
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