QA-Bio/艾美捷Endo F1：高特异性内切糖苷酶

Endo F1能够切割天冬酰胺连接的高甘露糖和一些混合型寡糖。核心的岩藻糖基化会将活性降低50倍。内切糖苷酶F1能够水解含有硫酸根的高甘露糖链。它在寡糖的二乙酰基壳二糖核心中的两个N-乙酰葡萄糖胺残基之间进行切割，生成一个截短的糖分子，该分子在天冬酰胺上保留一个N-乙酰葡萄糖胺残基。与之相反，PNGase F会完整地移除寡糖。

艾美捷QA-Bio-Endo F1：

货号：E-EF01

来源：重组Elizabethkingia miricola（之前称为Chryseobacterium meningosepticum）在大肠杆菌中的来源。

EC编号：EC 3.2.1.96

Endo F1的特异性：切割所有天冬酰胺连接的高甘露糖和一些混合型寡糖。

内容：60微升的小包装，含有1单位的酶，在20 mM Tris-HCl，pH 7.5中。

包含于20微升和60微升包装尺寸：

5倍反应缓冲液 – 250 mM磷酸钠，pH 5.5

比活性：16 U/mg

活性：17 U/ml

分子量：32,000道尔顿

建议用法：向Eppendorf管中加入多达200微克的糖蛋白。用去离子水调整至38微升的最终体积。

加入10微升的5倍反应缓冲液5.5。

加入2.0微升的Endo F1。在37°C下孵化1小时。

比活性：定义为在37°C，pH 5.5下，每分钟催化1微摩尔变性的核糖核酸酶B（RNase B）释放N-连接寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割（切割后的RNase B迁移速度更快）。

储存：将酶储存在4°C。

稳定性：在适当储存条件下至少稳定12个月。几天暴露在环境温度下不会降低活性。

纯度：对内切糖苷酶F1进行污染蛋白酶的测试如下：将10微克的变性牛血清白蛋白（BSA）在37°C下与2微升的酶共同孵化24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析显示没有降解迹象。

生产宿主菌株经过广泛测试，不产生任何可检测的糖苷酶。

额外的Endo F产品：

内切糖苷酶F2能够释放双天线和高甘露糖糖基（速率降低40倍）

内切糖苷酶F3能够释放三天线和岩藻糖基化的双天线N-糖基

Endo F多酶套装包括每种Endo F酶及其缓冲液的20微升。

QA-Bio-Endo F1文献参考：

Maley P., R. B. Trimble, A. L. Tarentino and T. H. Plummer Jr. Characterization of glycoproteins and their associated oligosaccharides through the use of endoglycosidases. Anal Biochem 180:195-204 (1989).

Plummer, T. H. Jr, A. W. Phelan and A. L. Tarentino. Porcine fibrinogen glycopeptides: substrates for detecting endo-N-acetylglucosaminidases F2 and F3. Anal Biochem 235:98-101 (1996).

Reddy A., B. G. Grimwood, T. H. Plummer Jr and A. L. Tarentino. High- level expression of the Endo-beta-N- acetylglucosaminidase F2 gene in E.coli: one step purification to homogeneity. Glycobiology 8:633-636 (1998).

艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

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