发布人:上海乐备实生物技术有限公司
发布日期:2024/6/25 8:54:33
多发性硬化症(MS)是一种以中枢神经系统(CNS)的白质和灰质发生炎性脱髓鞘为特征的自身免疫性疾病。全世界有250多万人患有这种疾病,其中大多数人的年龄在20-40岁之间。然而,多发性硬化症的治疗目前仅限于对症治疗,包括糖皮质激素、免疫抑制剂和B细胞缺失疗法。
随着补充和替代医学疗法的发展,其对许多疾病的治疗效果已得到证实。其中,针灸作为一种常用的治疗方法,在多发性硬化症患者中的使用率为7.2 ∼ 21%。针灸对多发性硬化症的疗效也已得到临床证实,但具体机制尚不明确。众所周知,免疫细胞上存在丰富的神经递质受体,如胆碱能受体、肾上腺素能受体(AR)、多巴胺受体、GABA受体等。因此,针灸是否能通过激活交感神经系统和调节免疫细胞功能来治疗EAE尚不清楚。本研究发现,针刺 ST36 可显著提高脾交感神经的兴奋性,促进外周 B 细胞和 CD4+T 细胞向抗炎方向分化。
LabEx提供的MSD检测服务:
样品在3000g转速下离心10分钟,收集上清液。将300 µl链接剂和200 µl相应的生物素标记抗体混合均匀,室温孵育30分钟。然后向该混合物中加入200 µl终止缓冲液,混匀后室温孵育30分钟。然后,在U-plex MSD板上涂抹制备好的抗体(50 µl/孔),室温下孵育 1小时。然后从每个烧瓶中取50 µl至另一个 EP 管中,用稀释剂稀释至250 µl为最高浓度点,依次稀释4倍,并设7个标准和1个空白。然后吸取60 µl的检测抗体,用稀释剂3稀释至3 ml,作为检测抗体稀释液。另外,准备 1*PBS (0.05% Tween-20) 作为洗涤缓冲液和 2* 读取缓冲液。
为了观察针灸是否能通过影响上述炎症过程来缓解EAE,研究者在发病高峰期通过MSD法检测了血清中多种细胞因子的浓度。我们发现针灸可以下调一些促炎细胞因子(IP-10、MIP-3α、IL-17F、IL-23、IL-33、GM-CSF、IFN-γ、IL-12p70、IL-6和IL-12/IL-23p40),上调一些抗炎细胞因子(IL-16、IL-21、IL-10、IL-27p28/IL-30、IL-4、EPO、VEGF-A、IL-5和IL-15)。
MSD 检测法用于检测血清中细胞因子的浓度。
重要发现:
-针刺可延缓EAE的发生,促进外周B细胞和CD4+T细胞向抗炎方向分化。
-用6-OHDA去脾交感神经可逆转针灸的作用。
-针刺可激活 CD4+T 和 B 细胞中的β2-AR-cAMP 信号通路。
-在 B 细胞存在的情况下,NE 可促进 CD4+T 细胞向抗炎方向分化。
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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
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组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
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