成都思天德生物科技有限公司

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今天分享肾上腺皮质激素类药物-达格列净特定杂质溶液稳定性研究分享，达格列净是一是一种竞争性葡萄糖协同转运蛋白2 (SGLT2) 抑制剂，可导致尿液中葡萄糖的排泄，用于糖尿病 (DM) 的研究。

 

在本次实验中，我中心参照国家药品监督管理总局发布的《达格列净》进口注册标准中“有关物质”项下所使用的色谱条件对达格列净地四个特定杂质进行了溶液稳定性研究，所用样品货号及结构式如下如图1和图2：

 

图1：本次研究所用杂质货号及结构式

 

图2：原料药及标准收录的杂质代码和本次研究所用杂质货号对应关系图

 

 

 

 

在本次实验中，实验员将RM-D021016(达格列净α异构体)、RM-D160722（恩格列净过氧化物）、RM-D160712（去乙基达格列净）和RM-D160713（代码BMS-801575）各取适量，分别放置在pH=A、B、C的溶液中，分别于0、1、2、4、8、12、24左右进样检测，发现RM-D021016、RM-D160712和RM-D160713三个样品在pH=A、B、C的溶液中放置24小时的过程中主峰峰面积变化不大，可以认为RM-D021016、RM-D160712和RM-D160713三个样品在pH=A、B、C的溶液中放置24小时的过程中是比较稳定的，这三个样品在各pH值条件下每个检测点主峰峰面积数据如下：

 

图3：样品RM-D160712的溶液稳定性数据汇总折线图

 

图4：样品RM-D160713的溶液稳定性数据汇总折线图

 

图5: 样品RM-D021016的溶液稳定性数据汇总折线图

 

 

 

 

在本次研究中，我们发现重点观测的杂质达格列净过氧化物RM-D160722在《达格列净》进口注册标准中“有关物质”项下所使用的色谱条件下出了双峰，于是本次研究通过开发方法在LCMS上检测了这两个色谱峰的分子量，发现两个色谱峰对应的MS峰的分子量相同，所以达格列净过氧化物RM-D160722在《达格列净》进口注册标准中“有关物质”项下所使用的色谱条件下出双峰的原因应该是由样品分子中的手性碳原子的异构所引起的：

 

图6:达格列净过氧化物杂质的手性碳原子示意图

 

图7：达格列净过氧化物杂质的LCMS图谱

 

图8：达格列净过氧化物杂质的MS分子量示意图（正离子）

 

图9：达格列净过氧化物杂质的MS分子量示意图（负离子）

 

从图8和图9可以看出，在正离子模式下，两个色谱峰都出了[M-OH]的分子量，在负离子模式下，两个色谱峰都出了[M+HCOOH]的分子量，所以从lc-ms数据可以验证前面的想法。

 

在后续稳定性检测的过程中，我们发现在达格列净过氧化物RM-D160722在pH=A、B、C的溶液中放置24小时的过程中，两个色谱峰的面积均有不同程度的降解，所以在将溶液放置N天后再次进样，发现样品均出现较多降解，其中以pH=A与pH=C条件下的样品降解明显，数据汇总折线图如下所示：

 

图10：达格列净过氧化物在pH=A、B、C的溶液中的稳定性数据图

图11：达格列净过氧化物在不同pH溶液中放置不同时间后的稳定性数据3D图

 

 

 

 

从以上数据可以看到，达格列净过氧化物RM-D160722在pH=A、B、C的溶液中放置N天的过程中，会发生不同程度的降解，尤其是在pH=A和pH=C的溶液中降解明显，所以客户在使用该样品时应注意避免用相关酸碱性溶液配制样品，尽量现配现测，在储存时应注意以防发生降解。

 

除此之外，本中心还对达格列净过氧化物进行了不同温度下的溶液稳定性实验，如果客户对该样品的稳定性内容有需要，可以向本公司咨询。