乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)

乳酸脱氢酶（LD或LDH）是一种糖酵解酶，主要作用是催化乳酸氧化为丙酮酸，将氢转移给NAD成为NADH。乳酸脱氢酶广泛存在于人体各组织中，最多见于心肌、骨骼肌和红细胞。乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LD/LDH）为含锌离子的金属蛋白，分子量为135~140kD，由H和M两种亚基组成，是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一，可催化丙酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应，也可催化相关的a-酮酸。
LDH广泛存在于人体组织中，以肾脏含量最高，其次是心肌和骨肌。红细胞内LDH约为正常血清的100倍。乳酸脱氢酶有5种同工酶，按其组织来源来说，LD1和LD2主要来源于心肌，临床常用的α-羧基丁酸脱氢酶（α-HBD）实际上就是LD1和LD2的活性之和；LD3主要来源于肺、脾；LD4和LD5（特别是LD5）主要来源于肝和骨骼肌。乳酸脱氢酶活性增高主要见于心肌梗死、急性或慢性肝炎、肝癌（尤其是转移性肝癌），其他可见于骨骼肌疾病、血液系统疾病、肺梗死、甲状腺功能减退、肾病综合征及晚期恶性肿瘤等。

乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)主要由四氮唑蓝孵育液、阴性对照组成。染色后酶活性部位呈蓝紫色沉淀。乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)以乳酸为底物，在酶作用下脱氢，硝基蓝四唑(nitro BT)为受氢体，接受氢后被还原为甲噁，呈蓝紫色，用以代表H型乳酸脱氢酶(心型，即LDH1)的活性。LDH1孵育液中含有特殊的中间递氢体，使定位更准确，染色更清晰。

1.冰冻切片，无需固定。
2.切片人LDH1孵育液中，置于温箱，浸染。
3.蒸馏水冲洗。
4.甘油明胶封固。