MLO-Y4 [MLOY4](小鼠骨样细胞)

MLO-Y4细胞是从14日龄（C57BL/6J x BALB/cJ）F2 Bgla启动子T-Ag转基因小鼠中分离的。MLO-Y4细胞的性质与原代骨细胞非常相似，与原代骨细胞相同而与原代成骨细胞不同的是，该细胞系产生大量骨钙素，但碱性磷酸酶含量较低，且产生非常少量的I型胶原mRNA。MLO-Y4细胞产生广泛、复杂的树突过程，并且T抗原、骨桥蛋白、神经抗原CD44和缝隙连接蛋白连接蛋白43呈阳性。。MLO-Y4细胞缺乏可检测到的成骨细胞特异性因子2的mRNA，这似乎是成骨细胞的阳性标志，也可能是骨细胞的阴性标志。MLO-Y4细胞对于研究机械应力对骨细胞功能的影响以及确定骨细胞与其他骨细胞（如成骨细胞和破骨细胞）相互作用的方式应该是有用的。 骨样细胞(树突状) 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 骨；SV40转化；(C57BL/6J x BALB/cJ) F2 Bgla promoter T-Ag transgenic；14日龄 贴壁细胞