L6 大鼠骨骼肌成肌细胞

L6成肌细胞是由Yaffe从大鼠大腿肌的原代培养物在3-甲基胆蒽存在下培养2代后分离得到，Yaffe称其为L6，因为他和Sara Neuman在1967年的六日战争中建立了该细胞系。L6细胞在培养基中可融合形成多核的肌管和横纹肌纤维，细胞融合的程度随着代数的增加而下降，因而L6细胞应冷冻于低代次阶段并周期性地重新克隆以选择融合能力强的细胞。如果让培养容器中的细胞长满，L6细胞的成肌组分将迅速耗尽。L6细胞表达肌球蛋白基因，是一种合适的转染宿主，经测试，鼠痘病毒呈阴性。 成肌细胞样(梭形或卵圆形) 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 大腿；骨骼肌成肌细胞；1日龄 贴壁细胞