CHO/DHFR- [CHO-DXB11](仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))

CHO/dhFr-细胞为二氢叶酸还原酶缺陷型，在没有外源嘌呤的情况下，细胞生长需要这种酶，因此CHO/dhFr-细胞系对次黄嘌呤（或腺嘌呤）、甘氨酸和胸腺嘧啶有需求，培养基中没有HT（次黄嘌呤-胸腺嘧啶）时，该细胞会死亡（细胞在不添加次黄嘌呤和胸苷的情况下继续生长，可能是因为细胞从培养基中获得了足够量）。CHO/dhFr-细胞培养基中加入氨甲喋呤可以防止对该药物具有低抵抗性的回变细胞的生长，可以保持细胞为二氢叶酸还原酶缺陷型。CHO/dhFr-细胞可作转染宿主。 成纤维细胞样(梭形或多角形) 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 卵巢；雌性；成年 贴壁细胞