DU 145 (人前列腺癌细胞) (STR鉴定正确)
DU 145 (人前列腺癌细胞) (STR鉴定正确)
DU 145 (人前列腺癌细胞) (STR鉴定正确) 用途与合成方法
DU 145 (人前列腺癌细胞) 是一种人前列腺癌细胞系,来源于一位69岁白人男性前列腺癌患者脑转移灶。Du145不表达雄激素受体AR,并且其生长不依赖于雄激素和AR信号。高表达间质标志物Vimentin,几乎不表达上皮标志物E-cadherin,CK8/18表达也较低。Du145有极强的成瘤能力,良好的转移性,较强的促血管新生能力,高表达VEGF (vascular endothelial growth factor),以及EGFR (epidermal growth factor receptor)等分子特征。由于Du145既不表达AR,又不表达神经内分泌标记物(neuroendocrine lineage marker),如Synaptophysin, Chromogranin A等,符合AR-NE- Double Negative Prostate Cancer的字面定义,被一些学者用作研究DNPC的分子机制。
完全培养基:EMEM(Eagle 最低必需培养基) + 10%FBS + 1P/S
气相:95% 空气 + 5% CO2
温度:37℃
传代比例:1:4 ~ 1:6
传代方法:弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(视细胞消化情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。最后将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
冻存液配制:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
冻存方法:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~ 1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。最后将冻存管放入梯度冻存盒,24 h后转入液氮灌储存。
DU 145 (人前列腺癌细胞)用于开发免疫功能低下小鼠的DU145异种移植模型,以研究前列腺癌的生物学,发育以及体外和体内的生长。由于DU-145前列腺癌细胞是雄激素受体非依赖性的。它们不依赖雄激素生长,当用雄激素处理时,在细胞和分子水平上没有反应。因此,非常适合研究激素非依赖性前列腺癌机制。它也可用作一种转移性前列腺癌的体外细胞模型,用于研究前列腺癌发展的分子机制。但它可能无法完全代表原发性前列腺肿瘤的复杂性。此外,由于雄激素受体独立性等特定特征,它可能并不意味着所有前列腺癌类型和亚型。
男性,69岁DU 145 (人前列腺癌细胞)的STR鉴定位点如下: