肝素价格
肝素 更多供应商 9005-49-6 肝素 价格
性状
肝素钠系自猪或牛的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐,为白色或类白色的粉末,无臭无味,有引湿性。在水中易溶,不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。
肝素注射液是肝素的灭菌水溶液,为无色或淡黄色的澄明液体;肝素冻疮软膏为含肝素钠的白色软膏。
本品因最早在狗的肝脏中被发现,故名肝素。在自然界中,肝素广泛分布在哺乳动物的肝、肺、心、脾、肾、胸腺、肠黏膜、肌肉和血液里,多与蛋白质结合成复合体存在。这种复合体无抗凝血活性,随着蛋白质除去而活性增加。在体内被肝脏产生的肝素酶灭活而随尿排泄出去。
肝素是含有硫酸酯的黏多糖,分子结构用一个四糖重复单元表示,组分是氨基葡萄糖、艾杜糖醛酸和葡萄糖醛酸。由于肝素分子中含有约占分子量的40%的硫酸根阴离子,因而带有许多负电荷,这种高度带负电的物理化学特性,干扰了血凝过程的许多环节。肝素的抗血栓形成作用,除了与各凝血因子活性被抑制外,尚有血管壁相互作用以及其他作用因素。此外,肝素还具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗炎、抗过敏的作用,还具有防止血栓形成、脑血管疾病、清除肾病形成等作用。
肝素注射液是肝素的灭菌水溶液,为无色或淡黄色的澄明液体;肝素冻疮软膏为含肝素钠的白色软膏。
本品因最早在狗的肝脏中被发现,故名肝素。在自然界中,肝素广泛分布在哺乳动物的肝、肺、心、脾、肾、胸腺、肠黏膜、肌肉和血液里,多与蛋白质结合成复合体存在。这种复合体无抗凝血活性,随着蛋白质除去而活性增加。在体内被肝脏产生的肝素酶灭活而随尿排泄出去。
肝素是含有硫酸酯的黏多糖,分子结构用一个四糖重复单元表示,组分是氨基葡萄糖、艾杜糖醛酸和葡萄糖醛酸。由于肝素分子中含有约占分子量的40%的硫酸根阴离子,因而带有许多负电荷,这种高度带负电的物理化学特性,干扰了血凝过程的许多环节。肝素的抗血栓形成作用,除了与各凝血因子活性被抑制外,尚有血管壁相互作用以及其他作用因素。此外,肝素还具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗炎、抗过敏的作用,还具有防止血栓形成、脑血管疾病、清除肾病形成等作用。
所属类别
生物化学品: 糖类: 聚糖
用途与作用
抗凝血药。
注射液:本品能阻抑血液的凝结过程,防止血栓的形成。用于预防和治疗血栓性疾病,预防外科手术后的血栓形成及作输血时抗凝剂。还用于血液透析时预防血凝块形成,也用于治疗深部静脉血栓形成。
软膏:早期冻疮、皲裂的治疗。
注意事项:偶见轻微出血,血小板减少。对本品过敏者,有出血倾向及凝血机制障碍,肝、肾功能不全,溃疡病及严重高血压,孕妇及产后妇女等患者忌用。
注射液:本品能阻抑血液的凝结过程,防止血栓的形成。用于预防和治疗血栓性疾病,预防外科手术后的血栓形成及作输血时抗凝剂。还用于血液透析时预防血凝块形成,也用于治疗深部静脉血栓形成。
软膏:早期冻疮、皲裂的治疗。
注意事项:偶见轻微出血,血小板减少。对本品过敏者,有出血倾向及凝血机制障碍,肝、肾功能不全,溃疡病及严重高血压,孕妇及产后妇女等患者忌用。
合成工艺与制法
方法一、酶解-树脂法
酶解 取100kg新鲜肠黏膜(总固体5%-7%),加苯酚200ml (0.2%),如气温低时可不加。在搅拌下加入绞碎胰0.5-1kg(0.5%-1%),用 300-400g/L(30%-40%)NaOH溶液调节pH8.5-9,升温至40-45℃,保温2-3h。pH8,再加5kg粗食盐(5%)升温至90℃左右,用6mol/L HCl调节pH 6.5左右,停止搅拌,保温20min,以布袋过滤,得酶解滤液。
肠黏膜[胰浆,NaOH]→[pH8.5-9, 40-45℃, 保温2-3h]肠黏膜液[NaCl, 6mol/L HCl]→[pH8; 90℃, pH6.5]滤液
吸附、洗涤、洗脱 取上述滤液冷至50℃以下,用6mol/L NaOH调节pH7,加入5kgD-254强碱性阴离子交换树脂,搅拌5h左右,交换完毕,弃去液体,用自来水漂洗树脂至水清,用与树脂等体积的2mol/L NaCl,搅拌洗涤15min,弃去洗涤液,再加2倍树脂体积的1.2mol/L NaCl洗涤2次。用约树脂体积一半的5mol/L NaCl洗脱1h,收集洗脱液,然后用约树脂体积的1/3的3mol/L NaCl洗脱2次,合并洗脱液。
滤液[D-254树脂, NaOH]→[pH7, 5h]吸附物[NaCl]→[2mol/L→1.2mol/L, →5mol/L, →3mol/L]洗脱液
沉淀、脱水、干燥 将洗脱液用滤纸浆助滤,过滤1次,澄清滤液以体积计加入用活性炭处理过的0.9倍的95%乙醇,冷处沉淀8-12h。虹吸上清液弃去,按100kg黏膜加300ml的比例向沉淀中补加蒸馏水,再加入4倍量95%乙醇,冷处放置6h,收集沉淀,用无水乙醇脱水1次,丙酮脱水2次,置P2O5干燥器中真空干燥,得肝素钠粗品。
洗脱液[95%乙醇]→[8-12h]沉淀物[无水乙醇;丙酮]→[P2O5]肝素钠粗品
脱色、沉淀、干燥 用20g/L(2%)氯化钠溶液配成100 g/L(10%)的肝素钠溶液,以40g/L(4%)高锰酸钾溶液进行氧化脱色,每亿单位估计加入0.65mol高锰酸钾。先将药液调至pH8,预热80℃,在搅拌下加入高锰酸钾,保温2.5h,以滑石粉作助滤剂,过滤,收集滤液。将滤液调节pH6.4,用0.9倍的95%乙醇置于冷处理沉淀6h以上,收集沉淀,溶于10 g/L(1%)氯化钠溶液中,用量按肝素钠粗品质量收率60%-70%计,配成50 g/L(5%)肝素钠溶液,再用4倍量的95%乙醇冷处放置6h以上,收集沉淀物,用无水乙醇、丙酮脱水,乙醚洗涤1次,置P2O5干燥器中干燥,得肝素钠精品。肠黏膜换算成总固体7%计,收率20000U/kg,最高效价141.6U/mg。
肝素钠粗品[20g/L NaCl]→肝素钠溶液[KMnO4]→[pH8, 80℃, 2.5h]滤液[95%乙醇]→[pH6.4, 6h]沉淀物[无水乙醇;丙酮;乙醚]→肝素钠精品
注射剂的制备 取肝素钠成品溶于一定量注射用水中,封口,灭菌,即得。
肝素钠精品[注射用水]→注射剂
方法二、盐解-树脂法
提取 取新鲜猪肠黏膜投入反应锅中,按30g/L(3%)加入氯化钠,NaOH调节pH9,逐步升温至50-55℃,保温2h,继续升温至95℃,维持10min,冷却50℃以下,用30目双层纱布过滤,收集滤液。
猪肠粘膜[NaCl; NaOH]→[pH9; 50-55℃]滤液
吸附、洗涤、洗脱、沉淀 取冷却50℃以下的滤液,加入714型(强碱性)Cl-型树脂(新树脂用量为2%),搅拌8h后静置过夜。次日虹吸除去上层液,收集树脂,用水冲洗至洗液澄清,滤干,用2倍量1.4mol/L氯化钠搅拌2h,滤干;再用1倍量1.4mol/L氯化钠搅拌2h,滤干;继续改用2倍树脂量的3mol/L氯化钠搅拌洗脱8h,滤干;再用1倍量3mol/L氯化钠搅拌洗脱2h,滤干,合并滤液,加入等量95%乙醇沉淀,过夜,虹吸除去上清液,收集沉淀。丙酮脱水干燥,得粗品。
滤液[714型树脂]→吸附物[NaCl]→[1.4mol/L, 3mol/L]洗脱液[95%乙醇,丙酮]→粗品
溶解、脱色、沉淀、干燥 粗品溶于15倍10 g/L(1%)氯化钠溶液中,加入6mol/L盐酸调pH1.5左右,过滤至清,随即用5mol/L氢氧化钠调节pH11,按3%加入过氧化氢(浓度为30%)25℃放置。开始不断调整pH至11,第2天再按1%加入过氧化氢,调整pH11,继续放置,共48h。过滤,用6mol/L盐酸调节pH6.5,加入等量的95%乙醇沉淀。过夜。次日虹吸除去上清液,沉淀用丙酮洗涤脱水,干燥,即得肝素钠精品。总收率20000U/kg肠黏膜(按肠黏膜的固体量为5%-7%计算)。
粗品[1%NaCl, 6mol/L HCL]→[pH1.5]滤液[NaOH, H2O2]→[pH11, 25℃, 48h]滤液[6mol/L HCl, 95%乙醇]→[pH6.5, 24h]沉淀[丙酮]→肝素钠精品
方法三、CTAB*提取法(*十六烷基三甲基溴化胺为长链季铵盐)
提取、络合 按猪肠黏膜液(V):Na2SO4(m):硫酸铝(m):CTAB(V)=1:0.15:0.04:0.001的配料比投料。取新鲜猪小肠黏膜投入反应罐中,搅拌下加入硫酸钠,溶解后,用碱液调节pH11-11.5,升温50℃,保温搅拌2h,再加硫酸铝,溶解后,用氢氧化钠调节pH7.5-8,升温至95℃,保温10min,趁热过滤,待滤液冷却至60℃以下时,缓缓加入CTAB和硅藻土,搅拌吸附1h,静置过夜,滤饼用40℃热蒸馏水洗至无色,抽干即得络合物。
猪肠黏膜液[Na2SO4,碱液, Al2(SO4)3]→[pH11-11.5, 50℃, 2h; pH7.5-8, 95℃, 10min]提取液[CTAB, 硅藻土]→[60℃以下,1h]滤饼[蒸馏水]→[40℃]络合物
解离、沉淀 取络合物溶于适量氯化钠溶液中,以冰醋酸调pH4,升温60℃,保温30min,静置过夜。次日吸取上清液,离心,收集清液,加入95%乙醇沉淀,再放置过夜,沉淀用丙酮洗涤,干燥即得肝素钠粗品。
络合物[NaCl, 冰醋酸]→[pH4, 60℃, 30min]滤液[95%乙醇,丙酮]→粗品
脱色、沉淀、去钾离子、干燥 将粗品用25倍新鲜配制的氯化钠溶液溶解,用氢氧化钠溶液调pH8,升温80℃后,加入适量的KMnO4溶液脱色,至颜色不退为止。过滤,滤液冷却后,加0.9倍95%乙醇沉淀,静置过夜。离心,沉淀加蒸馏水溶解,加强酸性苯乙烯阳离子树脂001×8,搅拌30min,过滤,滤液加10g/L (1%)的氯化钠,调pH10.5-11,按体积再加1%过氧化氢溶液,保持25℃,静置2天。过滤,滤液加等量的95%乙醇沉淀,静置24h,沉淀用乙醇、丙酮洗涤,真空干燥或冰冻干燥即得肝素成品。按肠黏液计,收率11000-15000U/kg。
粗品[NaCl, NaOH, KMnO4]→[pH8, 80℃]脱色液[95%乙醇]→沉淀物[水,001×8树脂]→[30min]去钾离子液[10g/L NaCl, H2O2]→[pH10.5-11, 25℃, 48h]脱色液[95%乙醇]→[24h]沉淀物[乙醇、丙酮]→肝素成品
方法四、以牛肺为原料
原料处理 取冻牛肺融化后,剪去主气管和较大气管,然后剪成长条,置绞碎机中用3mm绞板绞碎成肉糜状,所得净肺糜量为毛肺的70%-80%。
牛肺→[融化,绞碎]牛肺浆
自溶、提取、沉淀 取牛肺糜300kg,加水150g,搅拌均匀,加温45℃,加入甲苯6L,在39-41℃保温自溶20h,每半小时搅拌1次。再取27kg硫酸铵溶于90kg水中,加入自溶液中,用400g/L(40%)NaOH溶液调节pH8.8-9.2,水浴加温至50℃,保温搅拌1h,继续加热,在3h内升温至90℃,保温20min,冷却至50℃以下,布袋过滤,滤渣压滤,滤饼加100kg水和硫酸铵6kg再提取1次,弃去滤渣,合并2次提取液,约得提取液1.5-1.6kg/kg净肺重。将提取液用20%H2SO4调节pH2.5,放置过夜。沉淀肝素·蛋白络合物,虹吸弃去上清液,绸布过滤,沉淀用5倍量乙醇搅拌浸泡1h,过滤,滤渣再用5倍量乙醇搅拌洗涤2次,除去脂肪,滤干,得粗制湿品,收率1.2%-1.4%。
牛肺浆[自来水,甲苯]→[39-41℃, 20h]自溶液[(NH4)2SO4, 水,NaOH]→[pH8.8-9.2, 50℃, 1h]自溶液[90℃,20min]→提取液[H2SO4]→[pH2.5, 24h]肝素·蛋白络合物[乙醇]→[1h]粗品
解离 将粗品加入5倍量水和少量400g/L(40%)NaOH,调pH9-10,球磨半小时,使之成糨糊状,继续加水至粗品量的20倍,滴加40%NaOH至全溶,最终pH10。加入NaCl达100 g/L(10%),用20% H2SO4调pH2.5,静置过夜。吸取上清液,过滤,沉淀用2倍量的pH2.5、10%NaCl溶液洗涤1次,合并上层清液和洗涤液,得黄色透明肝素溶液。
粗品[水,NaOH]→[pH9-10]糊状物[水,NaOH]→[pH10]溶液[NaCl, H2SO4]→[pH2.5, 24h]肝素溶液
提纯、干燥 上述肝素溶液中加入等量水,用2mol/L NaOH液调pH7。按总体积计算称取溴化十五烷吡啶(PPB)25g,加水溶解成5%溶液,置分液漏斗中,用乙醚振摇3-4次,直至醚层完全无色为止,分出水层。在搅拌下将红色清液滴加于肝素溶液中,冰箱中静置过夜。收集沉淀,用蒸馏水洗涤2-3次,至洗液对1mol/L KSCN溶液无反应为止。沉淀用2mol/L NaCl溶液溶解,0.1mol/L NaOH溶液调pH7,2500r/min离心10min,去油状物,离心液布氏漏斗滤清,清液加入0.8倍量的丙酮,置冰箱中过夜。离心,收集沉淀,丙酮洗涤2-3次,置P2O5真空干燥器中干燥,得灰白色粉末肝素精品。按净肺质量计,收率0.11g/kg,效价90-100U/mg。
肝素溶液[水,NaOH, PPB]→[pH7]沉淀物[水,NaCl, NaOH]→[pH7]精品
脱色、除热原、干燥 将精品溶于15倍量的蒸馏水中,滴加1mol/L NaOH至pH8.5-9,滤去不溶物。按溶液体积以2%、0.5%、0.5%和1% 4次加入30% H2O2溶液,保持pH8.5-9,20h脱色完毕,过滤除去氧化物,得肝素脱色液。再滴加5mol/L NaOH溶液调节pH12-13,室温放置24h,按无热原操作法过滤,清液用5mol/L盐酸调pH7左右,再按溶液体积加入10g/L(1%)经250℃烘干1h的无热原NaCl,搅拌下加入0.8倍的丙酮,置冰箱4-5h,离心,收集沉淀。用50%丙酮洗涤2次,无水丙酮洗涤2次,乙醚洗涤1次,置P2O5真空干燥器中干燥,即得白色粉末状的肝素成品。按净肺质量计,收率9000 U/kg,效价130-140U/mg。
酶解 取100kg新鲜肠黏膜(总固体5%-7%),加苯酚200ml (0.2%),如气温低时可不加。在搅拌下加入绞碎胰0.5-1kg(0.5%-1%),用 300-400g/L(30%-40%)NaOH溶液调节pH8.5-9,升温至40-45℃,保温2-3h。pH8,再加5kg粗食盐(5%)升温至90℃左右,用6mol/L HCl调节pH 6.5左右,停止搅拌,保温20min,以布袋过滤,得酶解滤液。
肠黏膜[胰浆,NaOH]→[pH8.5-9, 40-45℃, 保温2-3h]肠黏膜液[NaCl, 6mol/L HCl]→[pH8; 90℃, pH6.5]滤液
吸附、洗涤、洗脱 取上述滤液冷至50℃以下,用6mol/L NaOH调节pH7,加入5kgD-254强碱性阴离子交换树脂,搅拌5h左右,交换完毕,弃去液体,用自来水漂洗树脂至水清,用与树脂等体积的2mol/L NaCl,搅拌洗涤15min,弃去洗涤液,再加2倍树脂体积的1.2mol/L NaCl洗涤2次。用约树脂体积一半的5mol/L NaCl洗脱1h,收集洗脱液,然后用约树脂体积的1/3的3mol/L NaCl洗脱2次,合并洗脱液。
滤液[D-254树脂, NaOH]→[pH7, 5h]吸附物[NaCl]→[2mol/L→1.2mol/L, →5mol/L, →3mol/L]洗脱液
沉淀、脱水、干燥 将洗脱液用滤纸浆助滤,过滤1次,澄清滤液以体积计加入用活性炭处理过的0.9倍的95%乙醇,冷处沉淀8-12h。虹吸上清液弃去,按100kg黏膜加300ml的比例向沉淀中补加蒸馏水,再加入4倍量95%乙醇,冷处放置6h,收集沉淀,用无水乙醇脱水1次,丙酮脱水2次,置P2O5干燥器中真空干燥,得肝素钠粗品。
洗脱液[95%乙醇]→[8-12h]沉淀物[无水乙醇;丙酮]→[P2O5]肝素钠粗品
脱色、沉淀、干燥 用20g/L(2%)氯化钠溶液配成100 g/L(10%)的肝素钠溶液,以40g/L(4%)高锰酸钾溶液进行氧化脱色,每亿单位估计加入0.65mol高锰酸钾。先将药液调至pH8,预热80℃,在搅拌下加入高锰酸钾,保温2.5h,以滑石粉作助滤剂,过滤,收集滤液。将滤液调节pH6.4,用0.9倍的95%乙醇置于冷处理沉淀6h以上,收集沉淀,溶于10 g/L(1%)氯化钠溶液中,用量按肝素钠粗品质量收率60%-70%计,配成50 g/L(5%)肝素钠溶液,再用4倍量的95%乙醇冷处放置6h以上,收集沉淀物,用无水乙醇、丙酮脱水,乙醚洗涤1次,置P2O5干燥器中干燥,得肝素钠精品。肠黏膜换算成总固体7%计,收率20000U/kg,最高效价141.6U/mg。
肝素钠粗品[20g/L NaCl]→肝素钠溶液[KMnO4]→[pH8, 80℃, 2.5h]滤液[95%乙醇]→[pH6.4, 6h]沉淀物[无水乙醇;丙酮;乙醚]→肝素钠精品
注射剂的制备 取肝素钠成品溶于一定量注射用水中,封口,灭菌,即得。
肝素钠精品[注射用水]→注射剂
方法二、盐解-树脂法
提取 取新鲜猪肠黏膜投入反应锅中,按30g/L(3%)加入氯化钠,NaOH调节pH9,逐步升温至50-55℃,保温2h,继续升温至95℃,维持10min,冷却50℃以下,用30目双层纱布过滤,收集滤液。
猪肠粘膜[NaCl; NaOH]→[pH9; 50-55℃]滤液
吸附、洗涤、洗脱、沉淀 取冷却50℃以下的滤液,加入714型(强碱性)Cl-型树脂(新树脂用量为2%),搅拌8h后静置过夜。次日虹吸除去上层液,收集树脂,用水冲洗至洗液澄清,滤干,用2倍量1.4mol/L氯化钠搅拌2h,滤干;再用1倍量1.4mol/L氯化钠搅拌2h,滤干;继续改用2倍树脂量的3mol/L氯化钠搅拌洗脱8h,滤干;再用1倍量3mol/L氯化钠搅拌洗脱2h,滤干,合并滤液,加入等量95%乙醇沉淀,过夜,虹吸除去上清液,收集沉淀。丙酮脱水干燥,得粗品。
滤液[714型树脂]→吸附物[NaCl]→[1.4mol/L, 3mol/L]洗脱液[95%乙醇,丙酮]→粗品
溶解、脱色、沉淀、干燥 粗品溶于15倍10 g/L(1%)氯化钠溶液中,加入6mol/L盐酸调pH1.5左右,过滤至清,随即用5mol/L氢氧化钠调节pH11,按3%加入过氧化氢(浓度为30%)25℃放置。开始不断调整pH至11,第2天再按1%加入过氧化氢,调整pH11,继续放置,共48h。过滤,用6mol/L盐酸调节pH6.5,加入等量的95%乙醇沉淀。过夜。次日虹吸除去上清液,沉淀用丙酮洗涤脱水,干燥,即得肝素钠精品。总收率20000U/kg肠黏膜(按肠黏膜的固体量为5%-7%计算)。
粗品[1%NaCl, 6mol/L HCL]→[pH1.5]滤液[NaOH, H2O2]→[pH11, 25℃, 48h]滤液[6mol/L HCl, 95%乙醇]→[pH6.5, 24h]沉淀[丙酮]→肝素钠精品
方法三、CTAB*提取法(*十六烷基三甲基溴化胺为长链季铵盐)
提取、络合 按猪肠黏膜液(V):Na2SO4(m):硫酸铝(m):CTAB(V)=1:0.15:0.04:0.001的配料比投料。取新鲜猪小肠黏膜投入反应罐中,搅拌下加入硫酸钠,溶解后,用碱液调节pH11-11.5,升温50℃,保温搅拌2h,再加硫酸铝,溶解后,用氢氧化钠调节pH7.5-8,升温至95℃,保温10min,趁热过滤,待滤液冷却至60℃以下时,缓缓加入CTAB和硅藻土,搅拌吸附1h,静置过夜,滤饼用40℃热蒸馏水洗至无色,抽干即得络合物。
猪肠黏膜液[Na2SO4,碱液, Al2(SO4)3]→[pH11-11.5, 50℃, 2h; pH7.5-8, 95℃, 10min]提取液[CTAB, 硅藻土]→[60℃以下,1h]滤饼[蒸馏水]→[40℃]络合物
解离、沉淀 取络合物溶于适量氯化钠溶液中,以冰醋酸调pH4,升温60℃,保温30min,静置过夜。次日吸取上清液,离心,收集清液,加入95%乙醇沉淀,再放置过夜,沉淀用丙酮洗涤,干燥即得肝素钠粗品。
络合物[NaCl, 冰醋酸]→[pH4, 60℃, 30min]滤液[95%乙醇,丙酮]→粗品
脱色、沉淀、去钾离子、干燥 将粗品用25倍新鲜配制的氯化钠溶液溶解,用氢氧化钠溶液调pH8,升温80℃后,加入适量的KMnO4溶液脱色,至颜色不退为止。过滤,滤液冷却后,加0.9倍95%乙醇沉淀,静置过夜。离心,沉淀加蒸馏水溶解,加强酸性苯乙烯阳离子树脂001×8,搅拌30min,过滤,滤液加10g/L (1%)的氯化钠,调pH10.5-11,按体积再加1%过氧化氢溶液,保持25℃,静置2天。过滤,滤液加等量的95%乙醇沉淀,静置24h,沉淀用乙醇、丙酮洗涤,真空干燥或冰冻干燥即得肝素成品。按肠黏液计,收率11000-15000U/kg。
粗品[NaCl, NaOH, KMnO4]→[pH8, 80℃]脱色液[95%乙醇]→沉淀物[水,001×8树脂]→[30min]去钾离子液[10g/L NaCl, H2O2]→[pH10.5-11, 25℃, 48h]脱色液[95%乙醇]→[24h]沉淀物[乙醇、丙酮]→肝素成品
方法四、以牛肺为原料
原料处理 取冻牛肺融化后,剪去主气管和较大气管,然后剪成长条,置绞碎机中用3mm绞板绞碎成肉糜状,所得净肺糜量为毛肺的70%-80%。
牛肺→[融化,绞碎]牛肺浆
自溶、提取、沉淀 取牛肺糜300kg,加水150g,搅拌均匀,加温45℃,加入甲苯6L,在39-41℃保温自溶20h,每半小时搅拌1次。再取27kg硫酸铵溶于90kg水中,加入自溶液中,用400g/L(40%)NaOH溶液调节pH8.8-9.2,水浴加温至50℃,保温搅拌1h,继续加热,在3h内升温至90℃,保温20min,冷却至50℃以下,布袋过滤,滤渣压滤,滤饼加100kg水和硫酸铵6kg再提取1次,弃去滤渣,合并2次提取液,约得提取液1.5-1.6kg/kg净肺重。将提取液用20%H2SO4调节pH2.5,放置过夜。沉淀肝素·蛋白络合物,虹吸弃去上清液,绸布过滤,沉淀用5倍量乙醇搅拌浸泡1h,过滤,滤渣再用5倍量乙醇搅拌洗涤2次,除去脂肪,滤干,得粗制湿品,收率1.2%-1.4%。
牛肺浆[自来水,甲苯]→[39-41℃, 20h]自溶液[(NH4)2SO4, 水,NaOH]→[pH8.8-9.2, 50℃, 1h]自溶液[90℃,20min]→提取液[H2SO4]→[pH2.5, 24h]肝素·蛋白络合物[乙醇]→[1h]粗品
解离 将粗品加入5倍量水和少量400g/L(40%)NaOH,调pH9-10,球磨半小时,使之成糨糊状,继续加水至粗品量的20倍,滴加40%NaOH至全溶,最终pH10。加入NaCl达100 g/L(10%),用20% H2SO4调pH2.5,静置过夜。吸取上清液,过滤,沉淀用2倍量的pH2.5、10%NaCl溶液洗涤1次,合并上层清液和洗涤液,得黄色透明肝素溶液。
粗品[水,NaOH]→[pH9-10]糊状物[水,NaOH]→[pH10]溶液[NaCl, H2SO4]→[pH2.5, 24h]肝素溶液
提纯、干燥 上述肝素溶液中加入等量水,用2mol/L NaOH液调pH7。按总体积计算称取溴化十五烷吡啶(PPB)25g,加水溶解成5%溶液,置分液漏斗中,用乙醚振摇3-4次,直至醚层完全无色为止,分出水层。在搅拌下将红色清液滴加于肝素溶液中,冰箱中静置过夜。收集沉淀,用蒸馏水洗涤2-3次,至洗液对1mol/L KSCN溶液无反应为止。沉淀用2mol/L NaCl溶液溶解,0.1mol/L NaOH溶液调pH7,2500r/min离心10min,去油状物,离心液布氏漏斗滤清,清液加入0.8倍量的丙酮,置冰箱中过夜。离心,收集沉淀,丙酮洗涤2-3次,置P2O5真空干燥器中干燥,得灰白色粉末肝素精品。按净肺质量计,收率0.11g/kg,效价90-100U/mg。
肝素溶液[水,NaOH, PPB]→[pH7]沉淀物[水,NaCl, NaOH]→[pH7]精品
脱色、除热原、干燥 将精品溶于15倍量的蒸馏水中,滴加1mol/L NaOH至pH8.5-9,滤去不溶物。按溶液体积以2%、0.5%、0.5%和1% 4次加入30% H2O2溶液,保持pH8.5-9,20h脱色完毕,过滤除去氧化物,得肝素脱色液。再滴加5mol/L NaOH溶液调节pH12-13,室温放置24h,按无热原操作法过滤,清液用5mol/L盐酸调pH7左右,再按溶液体积加入10g/L(1%)经250℃烘干1h的无热原NaCl,搅拌下加入0.8倍的丙酮,置冰箱4-5h,离心,收集沉淀。用50%丙酮洗涤2次,无水丙酮洗涤2次,乙醚洗涤1次,置P2O5真空干燥器中干燥,即得白色粉末状的肝素成品。按净肺质量计,收率9000 U/kg,效价130-140U/mg。
参考质量标准
原料药 | 中国药典2000年版314页 | |||
指标名称 | 指标 | 指标名称 | 指标 | |
效价/标示量的91%-110%/总氮量/% | 1.3-2.5 | |||
比旋度(40mg/m1)/≥十35°/硫/% | ≥10.0 | |||
pH值/5.0-7.5/干燥失重/% | ≤5.0 | |||
吸光度/无色澄清(A260nm≤0.20;A280nm≤0.15)/炽灼残渣/% | 28.0-41.0 | |||
重金属 | ≤百万分之三十 | |||
黏度 | (Pa·s) | ≤0.030 | 热原 | 符合规定 |
注射液 | 中国药典2000年版315页 | |||
指标名称 | 指标 | 指标名称 | 指标 | |
效价/% | 为标示量的86-116/热原/符合规定 | |||
pH值 | 5.5-8.5 | 其他 | 符合注射剂有关规定 |
肝素价格(试剂级)
- 更新日期 2023-03-20
- 产品编号 HY-17567
- 品牌
- 产品信息 肝素 Heparin
- CAS号 9005-49-6
- MDL号
- 规格与纯度
- 包装 10mg(10mg/mL in Water)
- 价格 550
- 库存信息 询问价格 & 货期