Chromatography

Chromatography 化学特性,用途語,生産方法

• 解説

  多孔質媒体（ろ紙）を固定相とし，これを通過する溶媒を移動相とすれば， 試料混合物中の各成分は，固定相と移動相に対する親和力の差によって両相の 間に異なる割合で分布し，成分により移動速度に差を生じ分離が行われる．こ の分析方法をペーパークロマトグラフィーという．溶質の Rf（rate of flow）は 次のように定義される．
  
  ただし Rf 値は実験条件（展開溶媒，温度，ろ紙等）のわずかな違いでかなり変 動する．展開の様子を詳しく示すと，以下の図のようになる．ここで，ろ紙にしみ込みながら上昇し ている溶媒の厚みを誇張して描いている．移動途中における試料成分の分子は，ろ紙に吸着している ものも，溶媒中に存在しているものもある．溶媒に溶けやすい物質ほどスムーズに移動するので，Rf 値が高くなる．展開溶媒が水であれば，親水性が強い成分ほど移動速度が大きくなる．溶媒がメタノ ールのときは，今度は親水性の成分がろ紙に吸着する傾向が強くなるため，移動速度が小さくなる．
  

• 実験

  幅 2 cm，長さ 20 cm のたんざく形ろ紙（東洋ろ紙 No.50）および混合試料（ローダミンＢ，メチル オレンジ，インジゴカーミン）と純物質（メチルオレンジ又はインジゴカーミン）を用意する．ろ紙 を持つときは，展開に使用する面に指を触れないように注意する．ろ紙の先端から約２cm のところに 鉛筆で線を引き，混合試料を含んだキャピラリーの先端を線上に軽く接触させる．この時ろ紙にしみ こんだスポットの直径は 2 mm 位の大きさになるようにする．1) さらに純物質を選択し，同様にスポ ットをつけ乾燥させる．クロマト管の中には展開溶媒としてメタノールと水の混合液がすでに入れて ある．クロマト管の奇数番号は水：メタノール＝1：3, 偶数番号は水：メタノール＝2：1 である．試 料をスポットしたろ紙をゴム栓の切り込みに挟み，下図のようにクロマト管の中に入れて密栓し展開 を開始する．2) この時，ろ紙の下端が溶媒に浸っていること，及びろ紙が壁面に触れていないことを 確かめる．3) スポットの分離が明らかになるまで展開したのち（1 時間以上かかる），ろ紙を取り出し， ゴム栓はクロマト管にすぐに戻してふたをする．4) まず溶媒がしみ込んだ先端をていねいに鉛筆でな ぞって線を書く．また，使用したクロマト管の番号（木枠に表示）も，ろ紙の上端に書き込んでおく． ろ紙をドライヤーで乾燥させる．純物質のスポットの中心に印を付け，原点からスポットの中心ま で，及び溶媒の先端までの距離を測って Rf 値を求める．純物質のスポットの位置が, 混合試料中のそ の成分のスポット位置と一致しているはずであるが, それを確かめる.
  

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