KLE人子宫内膜癌贴壁细胞系
- CAS号:
- 英文名:KLE
- 中文名:KLE人子宫内膜癌贴壁细胞系
- CBNumber:CB95832326
- 分子式:
- 分子量:0
- MOL File:Mol file
KLE人子宫内膜癌贴壁细胞系性质、用途与生产工艺
- 细胞特性 KLE细胞染色体为非整倍体,数目范围在51-66之间。KLE细胞裸鼠植瘤后,其肿瘤标本在电镜下显示,细胞间见紧密相连,细胞表面具有微绒毛。KLE细胞形态特征与孕激素刺激后的子宫内膜相似。
- 细胞复苏 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
-
细胞传代
KLE人子宫内膜癌贴壁细胞系细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
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细胞冻存
1)准备DMEM/F-12(推荐Bios-0005)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
KLE人子宫内膜癌贴壁细胞系上下游产品信息
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KLE人子宫内膜癌贴壁细胞系生产厂家
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