制备 酪氨酸脱羧酶工程菌的培养

酪氨酸脱羧酶

酪氨酸脱羧酶,,结构式
酪氨酸脱羧酶
  • CAS号:
  • 英文名:Tyrosine decarboxylase
  • 中文名:酪氨酸脱羧酶
  • CBNumber:CB92540727
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

酪氨酸脱羧酶性质、用途与生产工艺

  • 制备 有研究以pET28a为载体在宿主细胞E.coliBL21(DE3)中重组表达了短乳杆菌来源的酪氨酸脱羧酶,酪氨酸脱羧酶重组表达成功;酪氨酸脱羧酶最佳反应条件为50℃,pH=5.5;但考虑到长时间温度过高对酶活会有影响,所以选取40℃为宜。10mL0.2mol/L醋酸缓冲液中0.9g的酪氨酸与0.1g的菌体细胞反应7h,L-酪氨酸摩尔转化率达99%以上。
  • 酪氨酸脱羧酶工程菌的培养 挑取Origami(DE3)-pET21b-tdc单克隆菌体接入5mL含Amp(100μg/mL)、Kan(50μg/mL)的LB液体培养基中,37℃、200r/min振荡培养过夜。将种子液以2%接种量接种到含Amp(100μg/mL)、Kan(50μg/mL)的LB培养基,于37℃、200r/min的条件下培养,当OD600在0.6~0.8时加入IPTG,使IPTG终浓度为0.5mmol/L,28℃、150r/min诱导培养6h。当对BL21(DE3)plysS-pET21b-tdc进行培养时,抗生素为Amp(100μg/mL)和Cm(30μg/mL)。
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