植物激素脱落酸(ABA)ELISA试剂盒

简介实验原理实验步骤

植物激素脱落酸(ABA)ELISA试剂盒性质、用途与生产工艺

简介植物激素脱落酸(ABA)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附法检测样本中植物激素脱落酸(ABA)的表达水平。
实验原理往预先包被激素脱落酸（ABA）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的激素脱落酸（ABA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
实验步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
3. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
4. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
5.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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