细胞复苏 细胞传代 培养注意事项

人类鳞状上皮舌癌细胞

人类鳞状上皮舌癌细胞,,结构式
人类鳞状上皮舌癌细胞
  • CAS号:
  • 英文名:SCC-9
  • 中文名:人类鳞状上皮舌癌细胞
  • CBNumber:CB82985945
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file
人类鳞状上皮舌癌细胞化学性质
  • 储存条件 :-196°C

人类鳞状上皮舌癌细胞性质、用途与生产工艺

  • 细胞复苏 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
  • 细胞传代

    人类鳞状上皮舌癌细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。

    该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落,收集细胞后离心去上清,重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后次传代1:2进行,后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。

  • 培养注意事项

    准备DMEM/F12培养基;优质胎牛血清,10%;400ng/mL氢化可的松,双抗,1%。

    1)注意事项:

    (a)在细胞生长的初始阶段,细胞以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加,细胞呈现圆形并以叠加的形式生长。细胞密度达到一定的程度,会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中,镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。

    (b)该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时,用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落,收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。

    (c)该细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时,细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起,有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的,在传代时应收集起来,离心后细胞沉淀可以继续培养。

    (d)血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化,应选用高质量的胎牛血清。

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