应用 实验原理 操作步骤

内脂素试剂盒

内脂素试剂盒,,结构式
内脂素试剂盒
  • CAS号:
  • 英文名:Visfatin kit
  • 中文名:内脂素试剂盒
  • CBNumber:CB75527433
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

内脂素试剂盒性质、用途与生产工艺

  • 应用 内脂素试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中内脂素(Visfatin)的含量。
  • 实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人内脂素(Visfatin)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人内脂素(Visfatin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  • 操作步骤

    1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

    2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

    3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

    4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

    5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

    6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

    8. 实验结果计算

    以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

内脂素试剂盒上下游产品信息
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