胸腺五肽

简介作用机制生理功能药理作用制备方法用途药物说明胸腺五肽试剂级价格

胸腺五肽

CAS号:69558-55-0
英文名:Thymopentin
中文名:胸腺五肽
CBNumber:CB7491069
分子式:C30H49N9O9
分子量:679.77
MOL File:69558-55-0.mol

胸腺五肽化学性质

密度 :1.44±0.1 g/cm3(Predicted)
储存条件 :Keep in dark place,Inert atmosphere,Store in freezer, under -20°C
溶解度 :DMF: 30 mg/ml; DMSO: 25 mg/ml; Ethanol: 1 mg/ml; PBS (pH 7.2): 10 mg/ml
形态 :Powder
酸度系数(pKa) :3.07±0.10(Predicted)
颜色 :White
CAS 数据库 :69558-55-0(CAS DataBase Reference)

安全信息

WGK Germany :3
海关编码 :3504009000

胸腺五肽性质、用途与生产工艺

简介
胸腺五肽简称TP5，其英文名为Thymopentin，是一种人工合成的免疫调节五肽，是非常重要的免疫促进类活性多肽药物，能够显著提高人的免疫力，帮助人类有效的抵抗多种疾病，同时对多种疾病都有显著而确切的疗效，市场前景广阔，具有很好的经济和社会效益。
作用机制
胸腺五肽具有诱导和促进T淋巴及其亚群分化、成熟和活化的功能，调节T淋巴细胞的比例，使CD4+/CD8+趋于正常；调节和增强人体细胞免疫功能的作用，能促使有丝分裂原激活后的外周血中的T淋巴细胞成熟，增加T细胞在各种抗原或致有丝分裂原激活后各种淋巴因子(如：α、γ干扰素，白介素2或白介素3)的分泌，增加T细胞上淋巴因子受体的水平。它同时通过对T辅助细胞的激活作用来增强淋巴细胞反应。此外，它可能影响NK前体细胞的趋化，该前体细胞在暴露于干扰素后变得更有细胞毒性，有利于发挥其治疗作用。此外，胸腺五肽能增强人体抗辐射的能力。因此，它具有调节和增强人体细胞免疫功能的作用。
生理功能
胸腺五肽具有与胸腺素相同的调节免疫系统的功能，可诱导前T淋巴细胞分化、成熟，调节成熟T淋巴细胞的免疫活性。对多种免疫失调，如先天无胸腺、胸腺切除、老年胸腺萎缩性功能减退、感染、肿瘤以及自身免疫性疾病中因不同T淋巴细胞亚群的比例和功能改变而引起的免疫功能低下等，本药都有使免疫反应趋向正常的调节作用。
药理作用
胸腺生成素(thymopoietin)是存在于胸腺组织中的内源性多肽, 含49个氨基酸, 具有促进胸腺和外周T细胞分化, 调节机体免疫功能等生物活性。由胸腺生成素活性中心的32 ～ 36位氨基酸构成的胸腺五肽(thymopentin, TP5)虽仅含5个氨基酸残基, 却可有效保持胸腺生成素的生物活性。自1985年在意大利以商品名Timunox上市以来, TP5即作为免疫调节剂, 在临床用于包括慢性乙型肝炎、艾滋病、严重急性呼吸道综合征(severeacuterespiratorysyndrome, SARS)等疾病的治疗与预防。
【药理作用】
1.诱导和促进T细胞分化、成熟。
2.调节T淋巴细胞亚群比例使CD4/CD8趋于正常。
3.增强巨噬细胞吞噬功能。
4.增强红细胞介导的免疫功能。
5.提高自然杀伤细胞 (NK) 的活力。
6.提高白介素-2 (IL-2) 的产生水平与受体表达水平。
7.增强外周血单核细胞γ-干扰素的产生。
8.增强血清中SOD活性。
制备方法 TP-5的制备方法主要有液相合成法和固相合成法两种。
1.TP-5的液相合成：
(1)采用Boc(叔丁氧羰基)和Fmoc(9 -芴甲氧羰基)策略相结合的液相方法合成TP-5:保护氨基酸原料分别为:HCl·H-Tyr(Bzl)-OBzl、Boc-Val-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH和Fmoc-Arg(Pbf)-OH, 缩合试剂为BOP-HOBt, 缩合时间2 h, 反应溶剂为三氯甲烷, 碱中和试剂采用N-甲基吗啉(NMM)。最后保护基的脱除系统采用三氟甲磺酸/三氟醋酸(TFMSA/TFA)+苯甲硫醚, 0 ℃反应2 h。
(2)采用Boc氨基保护策略和碳链逐步增长法液相合成TP-5：氨基采用Boc-HCl/二噁烷保护系统, DCC-HOBt缩合得到全保护的Boc-Arg(Tos)-Lys(Z)-Asp(OBz1)-Val-Tyr(Bz1)-OMe, 皂化后, 采用TFA/TFMSA+苯甲醚、茴香硫醚和邻甲基苯酚, 室温反应1h, 脱除侧链得白色结晶, 纯化后总收率30%。
(3)采用液相最小保护策略逐步合成TP-5：氨基酸保护策略为:HC1· Tyr-OMe、Boc-Val-OH、Boc-Asp(OBz1)-OH、Boc-Lys(2C1Z)-OH、Z-Arg-OH, DCC-HOBt缩合形成二肽、三肽和四肽, HBTU缩合形成保护五肽, 最后采用Pd/C氢解脱除侧链保护得到目的产物。在不发生较大副反应的前提下, 侧链功能基尽量不采取保护, 可以避免HF的强酸裂解, 条件比较温和, 更适合于产业化。
2.TP-5 的固相合成
固相法主要有Boc/Bzl和Fmoc/OtBu两种合成保护策略。
(1)Boc固相合成法:Boc合成法的主要策略是采用TFA可脱除的Boc为α-氨基保护基, 侧链保护采用苄醇类。合成时将一个Boc-氨基酸衍生物共价交联到Merrifield或MBHA树脂上, 用TFA脱除Boc,用三乙胺中和游离的氨基末端, 然后通过DCC活化、偶联下一个氨基酸, 最终脱保护多采用HF法或TFMSA法。
(2)Fmoc固相合成法:Fmoc法与Boc法的根本区别在于采用了碱可脱除的Fmoc为α-氨基的保护基, 侧链的保护采用TFA可脱除的叔丁氧基等,树脂采用90%TFA可切除的对烷氧苄醇型树脂和1%TFA可切除的二烷氧苄醇型树脂, 最终的脱保护避免了强酸处理。Fmoc作为氨基保护基的优点在于其对酸稳定, 用TFA等试剂处理不受影响, 仅需用温和的碱处理, 通过β 2消除反应即可脱去, 不需用三级胺中和, 且Fmoc基团有特征性紫外吸收, 易于检测反应的进行, 给自动化合成带来方便。但Fmoc保护的氨基酸价格昂贵, 合成成本也相应较高。在TP-5的Fmoc固相合成中, 采用Wang树脂,DMF为溶剂, DIC-HOBt缩合, 侧链保护策略为:Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Val-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。
用途 1.用于18岁以上的慢性乙型肝炎患者。
2.各种原发性或继发性T淋巴细胞缺陷病。
3.某些自身免疫性疾病(如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等)。
4.各种细胞免疫功能低下的疾病。
5.肿瘤的辅助治疗。
有关胸腺五肽的药理作用、用途等、制备方法、药物说明是由Chemicalbook的丁红编辑整理。（2016-04-25）
药物说明 【用法用量】
1.皮下注射
(1)原发性免疫缺陷：开始时一日0.5～1mg/kg，连续2周；维持量为一次0.5～1mg/kg，一周2～3次。
(2)继发性免疫缺陷：一次50mg，每周3次，连续3～6周。
2.肌肉注射
(1)原发性免疫缺陷：开始时一日0.5～1mg/kg，连续2周；维持量为一次0.5～1mg/kg，一周2～3次。
(2)改善恶性肿瘤患者的免疫功能低下：与放疗、化疗同时使用，一日1次，一次1mg/kg，28日为一疗程。
【不良反应】
1.本药耐受性良好，个别可见恶心、发热、头晕、胸闷、无力等不良反应，少数患者偶有嗜睡感。
2.慢性乙型肝炎患者使用时可能ALT水平短暂上升，如无肝衰竭预兆出现，仍可继续使用本品。
【禁忌】
1.对本品有过敏反应者或器官移植者禁用。
2.已使用免疫抑制治疗的患者(如器官移植者)禁用。
【注意事项】
1.本品通过增强患者的免疫功能而发挥治疗作用，故对正在接受免疫抑制治疗的患者(例如器官移植受者)不应使用本品，除非治疗带来的裨益明显大于危险性。
2.治疗期间应定期检查肝功能。
3.目前尚不知道本药是否对胚胎有伤害，或是否影响生育能力。故本药只能在十分必要时才给孕妇使用。目前尽管未证实本品经人乳排出，但用于哺乳期妇女仍应特别慎重。
4.在18岁以下患者，本药的安全性和有效性尚未确立。
5.目前尚无任何关于人体过量(治疗或意外)的报道。动物毒性实验显示在10mg/kg剂量以下(目前研究所用最大量)没有任何副反应发生。
【药物相互作用】
1.本品与许多常用药物合并使用，其中包括干扰素、消炎药、抗生素、激素、镇痛药、降压药、利尿药、治疗心血管疾病的药物、中枢神经系统药物、避孕药，没有任何干扰现象出现。
2.本品与干扰素合用，对于改善免疫机能有协同作用。
化学性质 TP是从小牛胸腺提取的一种多肽，发现两种相似的类型：胸腺生成素-I (TP-I)和胸腺生成素-II(TP-II)。TP-II为49肽，由13种氨基酸组成。TP-I和TP-II的结构差异是TP-II肽链上丝1和苏43改变为TP-I的甘1和组43。精32-酪36的五肽在体内外均显示出TP-II的T细胞分化活性。49个氨基酸中5个有生理活性，现已人工合成精赖天胺缬酪5肽，即胸腺喷丁(timopentin)，并用于临床。
另外，从牛脾中分离的脾脏素(splenin)与TP-II相似，所以称为TP-III。人工合成的TP-II的5肽暂称为胸腺合成素(TPe)，合成的TP-III的5肽暂称为脾脏合成素(SPe)。TP-II和TPe作用于神经肌肉传递，诱导T细胞前体细胞的体外分化，同时抑制B细胞的分化。TP-III和SPe则可诱导T、B细胞前体细胞的分化。泛激素(Ubiquitin)由74个氨基酸残基组成，可诱导T细胞、B细胞分化，广泛存在于动物组织(含胸腺)和植物、菌类细胞中，与免疫功能有关。
用途具免疫激活作用，促进T细胞分化，调节神经肌肉传导，治疗重症肌无力症。
不良反应和禁忌：偶见皮肤瘙痒、皮疹、眼眶周围水肿、用药局部疼痛、红斑性损害，严重为白细胞减少。
用途免抑功能增强剂，用于治疗原发性或继发性免疫缺陷症
生产方法胸腺生成素-II的制备。
原料处理、浓缩以小牛胸腺为原料，加入0.1mol/L NH4HCO3，搅匀提取，得碱性蛋白液，加热至70℃除去变性杂蛋白，去除沉淀，将上清液浓缩。
小牛胸腺[0.1 mol/L NH4HCO3]→碱性蛋白液[70℃, 去杂蛋白]→[浓缩]浓缩液
分离、层析、精制经SephadexG-50和羟基磷石灰柱层析，分离，再经QAE-Sephadex柱层析，精制，即得胸腺生成素-II
浓缩液[Sephadex G-50]→[羟基磷石灰柱]层析液[QAE-Sephadex 柱]→胸腺生成素-II
胸腺生成素-II的提取
原料处理、超过滤、离心以新鲜牛脾为原料，加入0.1 mol/L NH4HCO3，匀浆提取，得碱性可溶性蛋白。用H10×100超过滤，将滤液浓缩，水浴加热至70℃，离心15 min，留上清液。
新鲜牛脾[0.1 mol/L NH4HCO3]→碱性蛋白液[超过滤，浓缩]→[70℃，离心15min]上清液
过柱纯化取上清液调节pH为5.2，加入阳离子交换树脂(50 mg/ml)，搅拌，过滤，再将滤液调节pH为9.5，加入阳离子交换树脂(50mg/m1)，搅拌，过滤，得滤液。
上清液[pH5.2, 阳离子柱]→滤液[pH9.5, 阳离子柱]→滤液
凝胶滤过、纯化滤液经Sephadex G-75凝胶过滤，得活性TP和泛激素，再经阴离子交换树脂层析(NH4HCO3, 离子强度变化0.1-0.8mol/L)，得 TP-III、杂蛋白和泛激素。
滤液[Sephadex G-75凝胶过滤]→活性TP和泛激素[阴离子树脂层析]→得TP-III、杂蛋白和泛激素。