细胞冻存 细胞复苏 细胞传代

人胚肾上皮包装细胞

人胚肾上皮包装细胞,,结构式
人胚肾上皮包装细胞
  • CAS号:
  • 英文名:GP2-293
  • 中文名:人胚肾上皮包装细胞
  • CBNumber:CB65732366
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

人胚肾上皮包装细胞性质、用途与生产工艺

  • 细胞冻存

    人胚肾上皮包装细胞培养基及培养冻存条件准备:

    1)准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号11965-092),90%;胎牛血清,10%。

    2)人胚肾上皮包装细胞培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

    3)人胚肾上皮包装细胞冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

  • 细胞复苏 将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
  • 细胞传代

    1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。

    3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。

    4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。

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